過表達CXCL16的轉基因小鼠血清MCP-1和ICAM-1水平的變化.pdf

1、背景：動脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)是嚴重威脅人類健康的一大類疾病，隨著我國人民生活水平提高和飲食習慣改變，該病成為我國主要死亡原因。隨著研究的深入，研究者們逐漸認識到炎癥反應在 AS發(fā)生機制中的重要性。CXC趨化因子配體16(CXC chemokine ligand16，CXCL16)屬于趨化因子CXC亞家族，通過與G蛋白偶聯受體相互作用可以誘導多種類型白細胞定向遷移，參與AS病變的炎癥反應。在 AS病變、風濕性

2、心瓣膜疾病及感染性心內膜炎等疾病中，CXCL16表達于巨噬細胞、血管平滑肌細胞及內皮細胞。除趨化作用外CXCL16還促進平滑肌的增殖、炎癥細胞粘附，并可作為清道夫受體促進巨噬細胞吞噬脂質形成泡沫細胞。此外，最近的研究顯示 CXCL16還有促進血管生成等與AS形成相關的作用。我們之前的實驗采用轉基因方法已構建了過表達CXCL16小鼠模型，并給出了CXCL16具有促進AS的證據，包括其升高血脂濃度，上調基質金屬蛋白酶-9表達和促AS發(fā)生的病

3、理學結果。本實驗在原有工作的基礎上完善了對轉基因小鼠體內 CXCL16過表達的驗證，并觀察轉基因小鼠中單核細胞趨化性蛋白1（Monocyte chemotactic proteins-1,MCP-1）、細胞間粘附因子-1（Intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1）這兩個對AS有較為明確影響的炎癥因子的表達變化。
　　目的：1.觀察轉基因小鼠血清及其主動脈壁處CXCL16的表達情況。
　

4、　2.觀察CXCL16過表達對AS中重要炎癥因子MCP-1、ICAM-1的影響。
　　方法：通過顯微注射構建的CXCL16轉基因小鼠為雜合子，行PCR篩選陽性后代合籠配種，反復多次形成 CXCL16轉基因純合子小鼠。所有小鼠先以普通飼料喂養(yǎng)，2周后隨機挑選20只CXCL16轉基因純合子小鼠作為轉基因組，隨機挑選20只C57BL/6J純系小鼠作為純系組，每組內隨機挑選10只飼以高脂飼料16周，另10只始終給予普通飼料。實驗分組：（1

5、）高脂轉基因組（2）高脂純系組（3）普食轉基因組（4）普食純系組。18周后實時熒光定量 RT-PCR檢測主動脈壁CXCL16mRNA含量；測量小鼠血脂水平；使用ELISA檢測小鼠血清MCP-1、ICAM-1與CXCL16濃度；免疫組化分析主動脈壁和主動脈瓣MCP-1、ICAM-1的表達。
　　結果：1.高脂轉基因組小鼠的總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平均比普食轉基因組小鼠的相應指標升高，差異有統計學意義（P<

6、0.05）;高脂純系組小鼠的總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平均比普食純系組小鼠的相應指標升高，差異有統計學意義（P<0.05）;高脂轉基因組小鼠的總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平均比高脂純系組小鼠的相應指標升高，差異有統計學意義（P<0.05）。
　　2.高脂轉基因組及普食轉基因組小鼠主動脈 CXCL16mRNA的表達和血清CXCL16水平分別高于高脂純系組及普食純系組小鼠，差異有統計學

7、意義（P<0.05）;高脂轉基因組及高脂純系組小鼠主動脈 CXCL16mRNA的表達和血清 CXCL16水平分別高于普食轉基因組及普食純系組小鼠，差異有統計學意義（P<0.05）。
　　3.高脂轉基因小鼠血清 MCP-1水平較高脂純系組、普食轉基因組均明顯升高（P<0.01）。普食轉基因組與普食純系組間MCP-1血清水平差異無統計學意義；高脂純系組與普食純系組間MCP-1的血清水平無統計學差異。
　　4.高脂轉基因組及高脂純

8、系組血清 ICAM-1水平分別較普食轉基因組及普食純系組明顯升高，差異有統計學意義（P<0.01）；高脂轉基因組及普食轉基因組血清ICAM-1水平分別較高脂純系組及普食純系組明顯增高，差異有統計學意義。
　　5.免疫組化發(fā)現高脂轉基因組小鼠主動脈壁及主動脈瓣區(qū)MCP-1與ICAM-1的表達高于高脂純系組。
　　結論：1、驗證了CXCL16在轉基因模型中過表達；
　　2、CXCL16的過表達增加了高脂飲食小鼠MCP-1和