磷脂酶C-γ1在大鼠發(fā)育過(guò)程中的mRNA表達(dá)及其前體mRNA剪接的初步探討.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)首先以大鼠為研究模型,利用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reversetranscriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測(cè)及分析大鼠在胚胎時(shí)期、出生后早期、成年時(shí)期各重要臟器PLCG1在mRNA水平上的時(shí)空表達(dá)變化,探討PLC-γ 1在轉(zhuǎn)錄水平對(duì)大鼠的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程的調(diào)控作用的影響.同時(shí),采用RT-PCR、序列分析等方法對(duì)大鼠PLC-γ 1的前體mRNA的剪接方式做初步探討,為進(jìn)一步研究它們

2、在不同的組織、不同的生長(zhǎng)發(fā)育階段中的表達(dá)及其功能機(jī)制奠定工作基礎(chǔ).結(jié)論:一、在大鼠不同的發(fā)育及生長(zhǎng)階段包括胚胎時(shí)期、出生早期、成年時(shí)期,肝、肺、腎、腦四種重要臟器組織中,PLCG1在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)均較強(qiáng);并且各時(shí)期之間的表達(dá)有顯著性差異;而在同一時(shí)期4種不同的組織間PLCG1的表達(dá)也有顯著性差異.因此,同一臟器組織在不同的發(fā)育時(shí)期及在同一時(shí)期不同臟器組織之間的PLCG1的差異性表達(dá)提示了通過(guò)對(duì)轉(zhuǎn)錄水平mRNA表達(dá)量的影響及mRNA穩(wěn)定性

3、的調(diào)節(jié),PLCG1的基因表達(dá)調(diào)控過(guò)程對(duì)大鼠生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中細(xì)胞的增殖與分化起著重要作用.二、從現(xiàn)有已分析的21份樣品中尚未發(fā)現(xiàn)與人類(lèi)相似的第一種剪接方式(PLC-γ 1a),這一實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:(1)導(dǎo)致這一結(jié)果可能因樣品涵蓋量不夠;(2)如果存在兩種剪接,其中一種表達(dá)占優(yōu)勢(shì),而另一種只是微量表達(dá),在PCR時(shí)表達(dá)占優(yōu)勢(shì)的剪接體擴(kuò)增占優(yōu),從而可能導(dǎo)致假陰性;(3)由于不同物種之間的差異,在大鼠中可能不存在與人類(lèi)已發(fā)現(xiàn)的PLC-γ 1前體mRN