丙二醛在繼發(fā)性脊髓損傷中的表達(dá)及其意義.pdf

1、目的：
　　 脊髓損傷是人類嚴(yán)重致殘和死亡的重要原因,急性脊髓損傷后常繼發(fā)多種神經(jīng)生化改變,這些改變?cè)诩又丶顾枥^發(fā)性損傷中起重要作用。近來自由基在參與脊髓繼發(fā)性損傷方面越來越受到人們的重視。本研究旨在建立鼠靜壓型脊髓損傷模型的基礎(chǔ)上,動(dòng)態(tài)觀察脊髓損傷后脊髓內(nèi)丙二醛(malonydialdehyed,MDA)表達(dá)的含量變化以探討脊髓繼發(fā)性損傷的病理機(jī)制。
　　 材料和方法：
　　 健康雄性SD大鼠70只,體重250

2、±20克隨機(jī)分為對(duì)照組10只損傷組60只,采用靜壓型大鼠SCI模型。各組大鼠分別于、傷后12小時(shí)、48小時(shí)、5天、7天、14天、21天,各時(shí)段通過頸動(dòng)脈放血處死。采用蘇木精-伊紅染色后,觀察病理學(xué)改變,脊髓中MDA檢測(cè):放血處死后,迅速取各時(shí)點(diǎn)受損節(jié)段脊髓組織MDA測(cè)定采用硫代巴比妥酸(TBA)比色法。數(shù)據(jù)采用SPSS13.0 for Windows統(tǒng)計(jì)軟件處理。所有均數(shù)以-X±S表示,不同時(shí)點(diǎn)組內(nèi)組間均數(shù)比較采用單因素方差分析。

3、>　　 結(jié)果：
　　 肉眼可見大鼠脊髓損傷局部組織充血。鏡下可見SCI后12～48小時(shí)損傷局部神經(jīng)元核固縮,胞體縮小,胞質(zhì)深伊紅染色,成為紅色神經(jīng)元。傷后2～5天,軸突腫脹,出現(xiàn)空泡,白質(zhì)內(nèi)神經(jīng)髓鞘散亂、崩解破裂。傷后7～14天膠質(zhì)細(xì)胞增生明顯,可見衛(wèi)星現(xiàn)象及鬼影細(xì)胞。傷后14～21天,損傷段脊髓變細(xì)部分灰質(zhì)崩解壞死,可見囊腔形成。對(duì)照組MDA含量為(22.03±2.98)μmol/g;傷后12h脊髓組織MDA含量立即升高,7

4、d時(shí)升至最高峰,升幅達(dá)90％,隨后逐漸下降,傷后21d恢復(fù)并接近傷前水平(t=1.983,P＞0.05)。各組之間的MDA水平不等或不全等(F=70.671 P＜0.01)。MDA值在7天內(nèi)顯著升高,并與損傷時(shí)間呈直線相關(guān)(r=0.765 p＜0.05)討論機(jī)體在創(chuàng)傷、腫瘤等病理狀態(tài)下,氧穩(wěn)態(tài)的平衡都會(huì)受到相當(dāng)?shù)挠绊?。?duì)于氧穩(wěn)態(tài)的失衡,機(jī)體會(huì)啟動(dòng)內(nèi)源性的調(diào)控機(jī)制。SCI后自由基介導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)在繼發(fā)性反應(yīng)中占有非常重要的地位,可以使

5、脊髓血流量進(jìn)一步減少、水腫加劇,引起嚴(yán)重神經(jīng)結(jié)構(gòu)與功能損傷甚至器質(zhì)性壞死,從而使神經(jīng)功能永久喪失。所以自由基與脂質(zhì)過氧化損傷學(xué)說在脊髓損傷發(fā)病機(jī)制中尤受重視。丙二醛(Malonyldialdehyde,MDA)作為脂質(zhì)過氧化最終產(chǎn)物,可直接反應(yīng)體內(nèi)自由基的變化和機(jī)體受自由基攻擊的嚴(yán)重程度。有研究發(fā)現(xiàn),損傷后早期脊髓MDA的含量就可以明顯升高。
　　 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,MDA含量傷后12h脊髓組織MDA含量立即升高,7d時(shí)升至最高峰

6、,升幅達(dá)90％,隨后逐漸下降,傷后21d恢復(fù)并接近傷前水平。MDA值在7天內(nèi)顯著升高,并與損傷時(shí)間呈直線相關(guān)。脊髓組織膜結(jié)構(gòu)含有豐富的脂質(zhì),脊髓損傷使神經(jīng)細(xì)胞線粒體氧化還原酶系脫耦聯(lián)產(chǎn)生大量氧自由基,后者易攻擊脂質(zhì)引發(fā)過氧化反應(yīng),從而破壞膜結(jié)構(gòu)的完整性,MDA是脂質(zhì)過氧化的最終產(chǎn)物,測(cè)定MDA可直接反映自由基水平,其含量高低是組織細(xì)胞損傷的重要標(biāo)志。對(duì)繼發(fā)性脊髓損傷的脊髓組織進(jìn)行病理學(xué)觀察發(fā)現(xiàn),鏡下可見SCI后12～48小時(shí)損傷局部神經(jīng)

7、元核固縮,胞體縮小,胞質(zhì)深伊紅染色,成為紅色神經(jīng)元。傷后2～5天,軸突腫脹,出現(xiàn)空泡,自質(zhì)內(nèi)神經(jīng)髓鞘散亂、崩解破裂。傷后7～14天膠質(zhì)細(xì)胞增生明顯,可見衛(wèi)星現(xiàn)象及鬼影細(xì)胞。傷后14～21天,損傷段脊髓變細(xì)部分灰質(zhì)崩解壞死,可見囊腔形成。實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明,在傷后12小時(shí)脊髓過氧化反應(yīng)已經(jīng)開始,隨著脊髓損傷的時(shí)間的增加,脊髓過氧化反映逐漸加重,病理學(xué)觀察顯示此時(shí)脊髓損傷已經(jīng)開始。在第7天左右氧化反應(yīng)到達(dá)高峰,MDA水平最高,此時(shí)病理學(xué)觀察發(fā)現(xiàn),

8、脊髓損傷逐漸加重。在傷后21天時(shí),脊髓的過氧化反映基本停止,但根據(jù)病理學(xué)結(jié)果發(fā)現(xiàn),此時(shí)脊髓損傷程度已經(jīng)達(dá)到高峰。
　　 因此我們認(rèn)為,繼發(fā)性脊髓損傷病理學(xué)改變與脂質(zhì)過氧化反應(yīng)密切相關(guān)。從而表現(xiàn)出自由基在脊髓損傷中的重要性。
　　 結(jié)論：
　　 脊髓損傷后丙二醛(MDA)表達(dá)開始升高,丙二醛(MDA)表達(dá)與繼發(fā)性脊髓損傷缺血缺氧及病理變化密切相關(guān)。其表達(dá)規(guī)律與損傷時(shí)間具有相關(guān)性。MDA可能參與了神經(jīng)元的保護(hù)與修復(fù)過