低氧誘導(dǎo)因子(HIF-1α)在繼發(fā)性脊髓損傷中的時(shí)序性表達(dá)及其意義.pdf

1、目的: 繼發(fā)性脊髓損傷的機(jī)制及其治療的研究越來(lái)越受到大家的關(guān)注。低氧誘導(dǎo)因子—1α是20世紀(jì)90年代對(duì)氧感受器—信號(hào)傳導(dǎo)—效應(yīng)基因的低氧反應(yīng)通路的重要發(fā)現(xiàn)。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為HIF—1α是誘導(dǎo)低氧基因和維持細(xì)胞氧內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的核心因子，可以調(diào)節(jié)能量代謝，血管形成，細(xì)胞凋亡，細(xì)胞分化，基質(zhì)合成等相關(guān)基因的表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察大鼠繼發(fā)性脊髓損傷中低氧誘導(dǎo)因子—1α(HIF—1α)的表達(dá)規(guī)律，探討其在繼發(fā)性脊髓損傷發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用。

2、 方法: SD大鼠66只，隨機(jī)分為對(duì)照組、假損傷組與各實(shí)驗(yàn)組(損傷后1h、3h、6h、12h、1d、2d、3d、7d、14d)。實(shí)驗(yàn)組建立大鼠靜壓脊髓損傷模型，損傷大鼠T10脊髓，假損傷組僅行椎板切除。各組大鼠到各相應(yīng)時(shí)點(diǎn)處死，40g/L多聚甲醛灌注固定，取損傷段脊髓約10.0mm，采用HE染色和免疫組化染色。檢測(cè)繼發(fā)性脊髓損傷中脊髓組織的病理變化情況和傷后不同時(shí)間HIF—1α的時(shí)序性表達(dá)情況。結(jié)果判定：以胞漿或胞核出現(xiàn)棕黃色

3、顆粒為陽(yáng)性。每張切片任選10個(gè)視野，計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)。數(shù)據(jù)用SPSSV11軟件包處理。 結(jié)果: 肉眼可見(jiàn)大鼠脊髓損傷局部組織充血。鏡下可見(jiàn)SCI后3～6h損傷局部神經(jīng)元核固縮，胞體縮小，胞質(zhì)深伊紅染色。傷后1～3d，軸突腫脹，出現(xiàn)空泡，白質(zhì)內(nèi)神經(jīng)髓鞘散亂、崩解破裂。傷后3～7d膠質(zhì)細(xì)胞增生明顯，可見(jiàn)衛(wèi)星現(xiàn)象及鬼影細(xì)胞。傷后14d，損傷段脊髓變細(xì)部分灰質(zhì)崩解壞死，可見(jiàn)囊腔形成。正常脊髓組織中極少能檢測(cè)到HIF—1α細(xì)胞，假手

4、術(shù)組稍有增多，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。傷后3h，HIF—1α陽(yáng)性產(chǎn)物開(kāi)始增多，主要在脊髓前角神經(jīng)元和少量膠質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)；傷后1天達(dá)峰值，陽(yáng)性產(chǎn)物可見(jiàn)于脊髓神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞、室管膜細(xì)胞及間質(zhì)內(nèi)的血管內(nèi)皮細(xì)胞等，其亞細(xì)胞定位于胞漿和胞核。HIF—1α免疫陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在傷后1～3h期間一直維持在一個(gè)較高水平，此后逐漸減少，傷后14d時(shí)，僅可見(jiàn)于少量白質(zhì)中的膠質(zhì)細(xì)胞。各實(shí)驗(yàn)組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。 結(jié)論: 脊髓