PSCAmRNA在膀胱和腎組織中的表達(dá)及其意義.pdf

1、第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文PSCAmRNA在膀胱和腎組織中的表達(dá)及其意義姓名：溫曉飛申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：外科學(xué)（泌尿外科）指導(dǎo)教師：孫穎浩2003050100級(jí)傾上論文PSCAmRNA在膀胱和腎組織中的表達(dá)及其意義中文摘要[背景]前列腺干細(xì)胞抗原(PSCA，prostatestemcellantigen)是一個(gè)新發(fā)現(xiàn)的腫瘤相關(guān)性細(xì)胞表面抗原，為L(zhǎng)y一6細(xì)胞表面抗原家族成員之一，其作用尚不清楚，推測(cè)可能與細(xì)胞分化、同型細(xì)胞的細(xì)胞間粘附、

2、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)。近年的研究主要集中于PSCA在不同前列腺組織中的表達(dá)，并形成了較為一致的觀點(diǎn)，認(rèn)為PSCA在約80％的CaP中呈高表達(dá)，且激素依賴和非激素依賴型CaP之間無明顯差異：在CaP的骨轉(zhuǎn)移灶中幾乎全部呈高表達(dá)且表達(dá)水平較原發(fā)灶更高；因此提出PSCA可能成為腫瘤免疫診斷和免疫治療的一個(gè)理想靶抗原。隨后的研究中發(fā)現(xiàn)，正常膀胱移行上皮、胎盤滋養(yǎng)層等亦有少量的PSCA表達(dá)，在部分膀胱癌和胰腺癌中似乎存在PSCA的過表達(dá)。而PSCA在泌尿

3、系腫瘤中的表達(dá)方面，國外的研究較少，國內(nèi)尚未見PSCA研究的相關(guān)報(bào)道。因此，系統(tǒng)地研究PSCA在泌尿系正常組織及相應(yīng)腫瘤中的表達(dá)情況，對(duì)尋找新的泌尿系腫瘤相關(guān)靶向抗原及其可能在免疫診斷和治療上的應(yīng)用有著重要的意義。[目的]本課題利用ISH技術(shù)，檢測(cè)PSCAmRNA在正常膀胱和腎臟組織以及在膀胱移行細(xì)胞癌和腎細(xì)胞癌中的表達(dá)水平，進(jìn)一步研究和完善PSCA在常見泌尿系統(tǒng)腫瘤中的表達(dá)情況，為探討PSCA在泌尿系腫瘤的免疫診斷與免疫治療方砸的應(yīng)用

4、價(jià)值提供理論依據(jù)。[方法](1)根據(jù)已知PSCA的全長(zhǎng)序列，采用RTPCR的方法，克隆出PSCA基因編碼框中部分片段，并裝入pMDl8T克隆載體保存；(2)將目的基因片段轉(zhuǎn)入含特異性SP6／T7RNA聚合酶啟動(dòng)子序列的pcDNA3載體，轉(zhuǎn)染JMl09大腸桿菌，擴(kuò)增后用體外轉(zhuǎn)錄法制各地高辛標(biāo)記的反義cRNA探針：(3)標(biāo)本采用新鮮手術(shù)切除組織，4％多聚甲醛固定，石蠟包埋，利用ISH技術(shù)，對(duì)20例正常膀胱組織、5例膀胱粘膜不典型增生及64例