鹿茸多肽提取分離純化及免疫活性的初步研究.pdf

1、鹿茸是絕大多數(shù)雄性鹿科動(dòng)物所生長的一種尚未骨化的幼角，作為中藥在我國已有兩千多年的歷史。鹿茸作為一種特殊的軟骨組織，是一個(gè)天然的富含多種活性因子的細(xì)胞因子庫，在其自體生長過程中，成骨、造血、神經(jīng)生長、纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞生長同步進(jìn)行、作為鹿體最活躍的生長點(diǎn)在其骨化之前貯存大量的生長因子，它們是鹿茸臨床作用的生物化學(xué)基礎(chǔ)，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明鹿茸具有廣泛的藥理學(xué)活性。但是鹿茸的促生長、促代謝、抗炎、免疫調(diào)節(jié)、健腦益智、抗衰老、生血、促進(jìn)傷口及骨

2、折愈合的藥理作用是目前已知化學(xué)成分所無法解釋的。因此，對鹿茸富含調(diào)控上述各器官組織發(fā)育成長的各種多肽類細(xì)胞生長因子的研究是十分有意義的。隨著國家對中藥現(xiàn)代化的逐步重視，我們選擇了鹿茸多肽對細(xì)胞免疫的調(diào)節(jié)作用進(jìn)行了研究。 一、鹿茸多肽的提取分離純化和含量測定鹿茸干片，小心切去邊緣絨毛，加入70％乙醇，4℃浸泡48小時(shí)，16000RPM高速離心取上清液。經(jīng)Superdex-75凝膠低壓層析，20％乙醇洗脫，在280nm紫外光譜下可見

3、6個(gè)獨(dú)立的蛋白質(zhì)吸收峰，分批收集洗脫液，得到6個(gè)組分，分別為標(biāo)注為組分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ。 二、鹿茸多肽對小白鼠免疫功能的影響本研究觀察了鹿茸多肽不同組分對小鼠外周血血清白介素-2含量、脾臟T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)、脾臟NK細(xì)胞殺傷活性和腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響，并嘗試衡量鹿茸多肽的免疫活性作用。 結(jié)果顯示：組分Ⅲ、Ⅳ和混合多肽組可以顯著提高小鼠外周血中IL-2的含量、在體內(nèi)應(yīng)用能極顯著協(xié)同ConA刺激脾臟淋巴細(xì)胞增殖以

4、及可以顯著提高小白鼠脾臟NK細(xì)胞的殺傷活性，并且達(dá)到了差異極顯著的水平(p＜0.01)，活性最強(qiáng)的是組分Ⅳ，但是組分Ⅳ與組分Ⅲ和粗提物之間差異不顯著(p＞0.05)；通過腹腔巨噬細(xì)胞吞噬中性紅實(shí)驗(yàn)可知，組分Ⅲ、Ⅳ和粗提物可以顯著提高小白鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能(p＜0.01)，活性最強(qiáng)的是粗提物，但是粗提物與組分Ⅲ和Ⅳ之間差異不顯著(p＞0.05)。在不同劑量鹿茸多肽對小鼠免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)存在劑量與免疫調(diào)節(jié)作用存在一定的相關(guān)關(guān)系，