己唑醇硝酸銅配合物對植物形態(tài)及ABA相關(guān)基因表達(dá)的影響.pdf

1、干旱脅迫對植物生長發(fā)育造成嚴(yán)重的損傷。小麥作為一種主要的糧食作物，如何有效緩解其在干旱脅迫下所受損傷，是解決人們生存大計的重要課題。三唑類化合物具有植物生長調(diào)節(jié)作用，同時可有效緩解非生物脅迫等對植物體的迫害。本文通過觀察己唑醇硝酸銅配合物對植物氣孔和根的形態(tài)影響，以及干旱脅迫下配合物對小麥幼苗ABA含量及ABA相關(guān)基因(ABA合成關(guān)鍵基因9-cis-epoxycarotenoid dioxigenase(NCED)和ABA分解重要基因A

2、BA8'-hydroxylase(CYP707A1)表達(dá)的影響，探究其是否可以緩解脅迫對植物造成的損害，提高植物體的耐早性。
　　(1)小麥和煙草葉片下表皮組織，進(jìn)行不同濃度配合物溶液和不同時間處理。0-100μM配合物處理1h，隨著配合物濃度增加，煙草和小麥氣孔開度逐漸減小，100μM時兩者氣孔開度達(dá)到最小值。設(shè)定的6個濃度(0μM、20μM、40μM、60μM、80μM、100μM)下，煙草氣孔開度平均值從2.37μm減小到0

3、.90μm。而小麥氣孔開度平均值大小為:1.06μm、0.96μm、0.75μm、0.63μm、0.59μm、0.55μm。0-9h不同時間配合物處理下，煙草和小麥氣孔孔徑同樣隨著處理時間的延長，逐漸減小。煙草氣孔孔徑平均值在80μM配合物處理后，從-0h的2.37μm減小到9h的0.94μm。小麥經(jīng)60μM配合物處理，氣孔孔徑相比對照依次減小40.6％(1h)、49.1％(3h)、50.9％(6h)、54.7％(9h)。己唑醇硝酸銅配

4、合物可降低植物氣孔孔徑。
　　掃描電鏡觀察小麥根尖在60μ-M己唑醇硝酸銅配合物處理下的變化。對照組小麥根尖根毛稀疏、短粗。處理組小麥根尖根毛濃密、纖長。兩組根尖形態(tài)學(xué)上端無明顯差別，而從距根尖形態(tài)學(xué)上端5mm處開始處理組根毛相比對照組濃密、纖長。
　　(2)利用實時定量PCR(real-time quantitative PCR，RT-qPCR)方法探究己唑醇硝酸銅配合物在干旱脅迫下對小麥幼苗ABA含量和相關(guān)基因NCED和

5、CYP707A1表達(dá)量的影響。結(jié)果顯示，干旱狀態(tài)下，對照組和己唑醇硝酸銅配合物處理組NCED表達(dá)量均低于未處理0h時的表達(dá)量。但在失水過程中(24-144h)對照組表達(dá)量逐漸升高，而處理組NCED表達(dá)量先降低(24-48h)后升高(96-144h);復(fù)水后(144-194h)兩組表達(dá)量均下調(diào)表達(dá)。ABA分解關(guān)鍵基因CYP707A1表達(dá)量在整個處理過程中，相對0h時都有所增高，對照組在144h達(dá)到最高，處理組168h表達(dá)量最高。同樣，對照

6、組和處理組CYP707A1表達(dá)趨勢不同，對照組表達(dá)量在干旱階段均高于處理組，復(fù)水后卻低于處理組。實驗發(fā)現(xiàn)，CYP707A1表達(dá)量的變化大于NCED。
　　脅迫下，小麥幼苗葉片對照組和處理組ABA含量相對0h都升高，96h達(dá)到最大值，分別為0h的4.38倍、4.64倍。整個過程中，處理組ABA高于對照組，所以，配合物具有提高小麥幼苗干旱耐受效能。
　　(3)通過對CYP707A1基因表達(dá)量的檢測，驗證了結(jié)合PCR擴(kuò)增技術(shù)及金納