一種新的絲氨酸蛋白酶-SNC19（ST14）基因編碼蛋白的生物特性的研究.pdf

1、為進一步研究SNC19（ST14）蛋白的生物特性,以及其在腫瘤轉(zhuǎn)移中的可能作用,該實驗在核酸水平的研究基礎(chǔ)上設(shè)計：1,將SNC19（ST14）基因克隆到原核表達質(zhì)粒,表達純化SNC19（ST14）-GST融合蛋白;2,用SNC19（ST14）-GST融合蛋白免疫小鼠,按雜交瘤技術(shù)制備SNC19（ST14）蛋白單克隆抗體;3,利用生物信息學方法進行SNC19（ST14）蛋白的結(jié)構(gòu)預測和功能分析;4,在mRNA水平用RT-PCR的方法研究在

2、正常大腸黏膜及相應腫瘤組織中表達;在蛋白水平應用免疫組織化學方法研究政黨消化道與相慶腫瘤組織表達分布情況,并研究在其他腫瘤中表達的情況,同時研究SNC19蛋白與其相關(guān)蛋白HAI-1蛋白在組織表達中的關(guān)系;5,用PCR-DNA序列分析的方法比較正常大腸黏膜及相應腫瘤組織中SNC19（ST14）基因組DNA外顯子序列的差異分析SNC19（ST14）基因突變情況.1.SNC19原核表達質(zhì)粒的構(gòu)建及融合蛋白的表達;2.SNC19單克隆抗體的制備

3、和生物學特性鑒定;3.SNC19蛋白結(jié)構(gòu)預測和功能分析;4.SNC19及其相關(guān)蛋白HAI-1在一些正常及腫瘤組織中表達分布的研究;5.SNC19基因突變情況的研究.結(jié)論：1.原核表達SNC19基因cDNAR的部分ORF成功,并獲得純化的SNC19-GST融合蛋白.2.成功制備抗SNC19單克隆抗體ZMG9,有較高的特異性和敏感性.3.SNC19蛋白是一種新的Ⅱ型跨膜絲氨酸蛋白酶,其結(jié)構(gòu)上的特點顯示該蛋白與細胞表面發(fā)生的蛋白水解有關(guān).4.