人卵泡液、胚胎培養(yǎng)液和冷凍精液中蛋白氧化應(yīng)激的研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩59頁未讀 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、本研究擬在ROS在生殖方面的研究和蛋白氧化在人類其它組織研究的基礎(chǔ)上,以晚期氧化蛋白產(chǎn)物(advanced oxidation protein products,AOPP)為蛋白氧化損傷的指標(biāo),觀察人卵泡液、胚胎培養(yǎng)液和低溫冷凍精液中是否存在ROS介導(dǎo)的蛋白氧化損傷,并初步探討其與卵母細胞和早期胚胎發(fā)育的關(guān)系。 第一章人卵泡液中蛋白氧化水平與IVF-ET結(jié)局參數(shù)的關(guān)系 【目的】 探討體外受精一胚胎移植(in vi

2、tro fertilization-embryo transplantation,IVF-ET)周期卵泡液中蛋白氧化水平與IVF-ET結(jié)局參數(shù)的關(guān)系。 【方法】 1.標(biāo)本來源和分組:卵泡液標(biāo)本來自南方醫(yī)院生殖中心2005年7月至2006年4月之間接受IVF-ET治療的64例不孕癥女性患者。病例選擇標(biāo)準(zhǔn):年齡在25~38歲,平均年齡32.41±3.17歲;單純輸卵管性因素不孕;行常規(guī)IVF-ET治療;HCG日子宮內(nèi)膜在8.

3、0 mm以上,并且無內(nèi)膜病變。根據(jù)獲卵數(shù)分為三組,獲卵數(shù)<8個組16例,獲卵數(shù)8~15個組32例,獲卵數(shù)>15個組16例。根據(jù)患者年齡分為三組,年齡<30歲組11例,30歲~35歲組41例,>35歲組12例。 2.實驗方法:以AOPP作為蛋白氧化指標(biāo),采用Vitko-Sarsat等介紹的方法進行測定。 3.統(tǒng)計學(xué)方法:所有數(shù)據(jù)應(yīng)用spss10.0統(tǒng)計軟件進行分析,P<0.05認為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(s±

4、s)或百分率(%)表示,采用偏相關(guān)分析、One-way ANOVA方差分析和獨立樣本t檢驗。 【結(jié)果】 1.卵泡液中AOPP水平與成熟卵母細胞比例(r=-0.401,p=0.001)、受精率(r=-0.257,P=0.045)、卵裂率(r=-0.290,P=0.024)、良好胚胎形成率(r=-0.520,P=0.000)均呈顯著負相關(guān)。 2.不同獲卵數(shù)組之間AOPP水平有顯著性差異(F=3.851,P=0.027

5、),其中以獲卵數(shù)8~15個組AOPP水平最低,獲卵數(shù)<8個組最高。 3.非妊娠組AOPP水平高于妊娠組,有顯著性差異(t=3.665,P=0.001)。 4.不同年齡組AOPP水平差異有顯著性意義(F=15.919,P=0.000),其中年齡>35歲組AOPP水平最高,<30歲組最低。 【結(jié)論】 1.IVF-ET周期中,卵泡液中存在蛋白氧化應(yīng)激現(xiàn)象。 2.卵泡液中高水平的AOPP可能對卵母細胞和早

6、期胚胎發(fā)育造成不良影響,繼而影響IVF結(jié)局。 第二章第一天胚胎培養(yǎng)液中蛋白氧化水平與早期胚胎發(fā)育的關(guān)系 【目的】探討:IVF-ET周期第一天胚胎培養(yǎng)液中蛋白氧化水平與早期胚胎發(fā)育的關(guān)系。 【方法】 1.標(biāo)本來源和分組:第一天胚胎培養(yǎng)液標(biāo)本來自南方醫(yī)院生殖中心2005年7月至11月之間進行常規(guī)IVF治療的30例患者和單精子卵細胞內(nèi)注射(intracytoplasmic sperm injeetion-emb

7、ryo transplantation,ICSI-ET)治療的30例患者。分組:根據(jù)受精類型分為兩組,常規(guī)IVF組30例和ICSI組30例。根據(jù)不孕婦女年齡分組,常規(guī)IVF組30例中年齡<30歲組4例,30歲~35歲組17例,>35歲組9例;ICSI組30例中年齡<30歲組8例,30歲~35歲組18例,>35歲組4例。 2.實驗方法:以AOPP作為蛋白氧化指標(biāo),采用Vitko-Sarsat等介紹的方法進行測定。 3.統(tǒng)計

8、學(xué)方法:所有數(shù)據(jù)應(yīng)用spss10.0統(tǒng)計軟件進行分析,P<0.05認為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,采用偏相關(guān)分析,獨立樣本t檢驗和One-wayANOVA方差分析。 【結(jié)果】 1.常規(guī)IVF周期中,第一天胚胎培養(yǎng)液中AOPP濃度在3.2μmol/l以下時,其變化與受精率(r=0.137,P=0.863)、卵裂率(r=0.623,P=0.377)、碎片10%以下胚胎形成率(r=-0.156,P=0.

9、844)、六細胞以上胚胎形成率(r=-0.444,P=0.556)無相關(guān)性;在3.2μmol/l以上時,AOPP水平與受精率(r=-0.226,P=0.338)、卵裂率(r=0.202,P=0.392)、碎片10%以下胚胎形成率(r=-0.232,P=0.325)、六細胞以上胚胎形成率(r=0.008,P=0.975)亦無相關(guān)性。 2.ICSI周期中,第一天胚胎培養(yǎng)液中AOPP濃度在3/2 μmol/l以下時,其變化與受精率(r

10、=-0.323,P=0.791)、卵裂率(r=0.014,P=0.991)、碎片10%以下胚胎形成率(r=0.238,P=0.847)、六細胞以上胚胎形成率(r=-0.029,P=0.982)無相關(guān)性;在3.2 μmol/l以上時,AOPP水平與受精率(r=-0.472,P=0.031)、碎片10%以下胚胎形成率(r=-0.482,P=0.027)、六細胞以上胚胎形成率(r=-0.548,P=0.010)呈顯著負相關(guān),與卵裂率(r=-0

11、.096,P=0.679)無相關(guān)性。 3.常規(guī)IVF周期中,非妊娠組中AOPP水平高于妊娠組,有顯著性差異(t=3.160,P=0.004);不同年齡組AOPP水平有顯著性差異(F=19.395,P=0.000),其中不孕婦女年齡>35歲組AOPP水平最高,<30歲組最低。 4.ICSI周期中,非妊娠組AOPP水平高于妊娠組,有顯著性差異(t=2.421,P=0.022);不同年齡組AOPP水平有顯著性差異(F=3.97

12、5,P=0.031),其中不孕婦女年齡>35歲組AOPP水平最高,<30歲組最低。 【結(jié)論】 1.IVF-ET周期中,第一天胚胎培養(yǎng)液中存在蛋白氧化應(yīng)激現(xiàn)象。 2.ICSI周期中,第一天胚胎培養(yǎng)液中高水平的AOPP可能對早期胚胎發(fā)育和IVF結(jié)局造成不良影響。 3.常規(guī)IVF周期中,第一天胚胎培養(yǎng)液中高水平的AOPP雖然不影響早期胚胎發(fā)育,但對IVF結(jié)局造成不良影響。 第三章低溫冷凍和孵育對人精子氧

13、化應(yīng)激水平的影響 【目的】探討低溫冷凍和孵育對人精子氧化應(yīng)激水平的影響。 【方法】 1.標(biāo)本來源和分組:60例正常人精液標(biāo)本取自南方醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心因女性因素行試管嬰兒治療的男性患者。將每一例精液標(biāo)本,梯度離心法處理后,取得沉淀之精子,加人輸卵管培養(yǎng)液(human tubal fluid,HTF),配制成精子密度在(20~30)×10<'6>/mL的懸液,取2.5 mL均分五份,分為五組,分別進行以下處理:A組為

14、處理前對照組,不進行低溫冷凍處理或孵育處理。B組為低溫冷凍空白實驗組,去除精子后的精子懸液進行低溫冷凍處理。C組為低溫冷凍樣本組,含精子的精子懸液進行低溫冷凍處理。D組為孵育空白實驗組,去除精子后的精子懸液進行孵育處理。E組為孵育樣本組,含精子的精子懸液進行孵育處理。 2.實驗方法:以AOPP作為蛋白氧化指標(biāo),采用Vitko-Sarsat等介紹的方法進行測定。以丙二醛(malondialdebyde,MDA)作為脂質(zhì)過氧化指標(biāo),

15、采用硫代巴比妥酸(thiobarbituri,TBA)比色法。 3.統(tǒng)計學(xué)方法:所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,采用SPSS10.0統(tǒng)計軟件進行分析,P<0.05為差異顯著。采用One-way ANOVA方差分析,AOPP水平的多重比較采用Tamhane’s T2方法,MDA水平的多重比較采用最小有意義差異(least significant difference,LSD)t檢驗方法。 【結(jié)果】 1.不同處

16、理組之間AOPP水平(F=19.994,P=0.000)和MDA水平(F=31.837,P=0.000)均有顯著性差異。 2.低溫冷凍樣本組MDA水平顯著高于處理前對照組(P=0.000)和低溫冷凍空白實驗組(P=0.000),但AOPP水平無顯著性差異(P<,1>=0.663;P<,2>=0.829)。 3.孵育樣本組AOPP和MDA水平均顯著高于處理前對照組和孵育空白實驗組(AOPP:P<,1>=0.000;P<,2

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論