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文檔簡介
1、目的:制作近紅外靶向碲化鎘(CdTe)量子點(Quantum Dots,QDs)探針對人胃癌細胞株MGC80-3進行特異性免疫熒光成像。
方法:將人胃癌特異性抗原TAG-72(Tumor-associated Glycoprotein72)的單克隆抗體CC49與碲化鎘量子點結(jié)合,制成具有特異性標記功能的靶向碲化鎘量子點探針。采用透射電鏡觀察、熒光光譜分析以及高效液相色譜分析(HPLC)等方法對制成的樣品特性進行研究分析。采用蛋
2、白質(zhì)印跡(Western Blot)和免疫組織化學法對細胞株表面的抗原TAG-72進行檢測。采用直接免疫熒光法,通過靶向碲化鎘量子點探針與胃癌表面抗原TAG-72的特異性結(jié)合對胃癌細胞進行免疫熒光成像。
結(jié)果:透射電鏡成像顯示靶向量子點探針直徑較量子點直徑增加了僅約0.3nm。光譜分析顯示靶向碲化鎘量子點探針發(fā)射光光譜與未結(jié)合抗體的碲化鎘量子點發(fā)射光光譜基本相同。高效液相色譜分析顯示實驗合成了的靶向碲化鎘量子點探針溶液樣品中含
3、有兩種物質(zhì),即靶向碲化鎘量子點和少量游離的CC49單克隆抗體。Western Blot和免疫組織化學法檢測顯示人胃癌細胞株MGC80-3表面存在特異性抗原TAG-72,而正常胃粘膜上皮細胞株GES-1細胞表面未檢測到抗原TAG-72。胃癌細胞免疫熒光成像顯示實驗中制作的靶向碲化鎘量子點能夠與胃癌細胞特異性結(jié)合并顯像。
結(jié)論:通過本項研究可以制作一種能夠特異性結(jié)合胃癌細胞的靶向碲化鎘量子點探針,在體外能夠?qū)ξ赴┘毎赀M行特異性免
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