量子點(diǎn)熒光探針細(xì)胞標(biāo)記的研究.pdf

1、量子點(diǎn)作為一種新型的熒光納米材料,具有優(yōu)于其他熒光材料如有機(jī)熒光染料、熒光蛋白的光學(xué)性質(zhì)。近年來(lái),量子點(diǎn)已被廣泛的應(yīng)用于細(xì)胞標(biāo)記,組織及活體成像等領(lǐng)域。當(dāng)量子點(diǎn)被用于生物成像標(biāo)記時(shí),常被修飾上各種特異性的生物分子,因而評(píng)價(jià)修飾后的量子點(diǎn)熒光探針是很必要的?；诖?本論文用三種方法制備了量子點(diǎn)-轉(zhuǎn)鐵蛋白熒光探針,并搭建了一套系統(tǒng)用于評(píng)價(jià)三種量子點(diǎn)-轉(zhuǎn)鐵蛋白熒光探針細(xì)胞標(biāo)記效果,論文具體完成的工作如下:
　　(1)用靜電連接、偶聯(lián)劑E

2、DC偶聯(lián)和變性轉(zhuǎn)鐵蛋白包覆三種方法制備了CdTe/CdSe量子點(diǎn)-轉(zhuǎn)鐵蛋白熒光探針,并通過(guò)不同的手段如發(fā)射光譜、毛細(xì)管電泳、測(cè)量其zeta電位等對(duì)其進(jìn)行了表征,結(jié)果發(fā)現(xiàn)相對(duì)于單純的量子點(diǎn),靜電連接、偶聯(lián)劑EDC偶聯(lián)制備的量子點(diǎn)-轉(zhuǎn)鐵蛋白熒光探針的熒光強(qiáng)度均有所降低,而變性轉(zhuǎn)鐵蛋白包覆制備的量子點(diǎn)-轉(zhuǎn)鐵蛋白熒光探針熒光強(qiáng)度略有增強(qiáng),而這三種方法制備的量子點(diǎn)-轉(zhuǎn)鐵蛋白熒光探針zeta電位的值均降低,這說(shuō)明量子點(diǎn)-轉(zhuǎn)鐵蛋白探針膠體體系變得不穩(wěn)

3、定。且將這三種量子點(diǎn)-轉(zhuǎn)鐵蛋白熒光探針進(jìn)行了細(xì)胞標(biāo)記實(shí)驗(yàn),通過(guò)CCD細(xì)胞成像及實(shí)時(shí)熒光光譜對(duì)標(biāo)記效果進(jìn)行了研究。
　　(2)本文建立了一種在毛細(xì)管中壓力驅(qū)動(dòng)液流的細(xì)胞標(biāo)記效率檢測(cè)簡(jiǎn)便方法。該方法利用微流注射泵將待檢測(cè)的標(biāo)記細(xì)胞組注射到毛細(xì)管的進(jìn)樣端,在壓力的驅(qū)動(dòng)下,細(xì)胞逐個(gè)通過(guò)檢測(cè)窗口,利用雙通道光譜儀監(jiān)測(cè)細(xì)胞的一系列熒光信號(hào)峰,之后對(duì)信號(hào)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析就可得到標(biāo)記的效率。我們利用這一套系統(tǒng)對(duì)上述三種不同方法制備的量子點(diǎn)-轉(zhuǎn)鐵蛋白熒