胞膜-6A8-α-甘露糖苷酶.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該論文工作的目的就是:1)確證6A8蛋白質為一種α-甘露糖苷酶;2)6A8蛋白質在細胞中的定位,檢測它是否也表達于胞膜,是一種胞膜酶.為了確證6A8蛋白質的α-甘露糖苷酶本質,作者采用分子克隆重組技術將該室克隆到的3個6A8 cDNA片段連成一個完整的3300bp cDNA,經(jīng)測序完全正確,再將它插入真核表達載體pCDNA3中,在COS-7細胞中獲得瞬時表達.以野生型及轉染空載體的COS-7細胞作對照.觀察到轉染6A8 cDNA-pCD

2、NA3的COS-7細胞蛋白勻漿上清液對p-nitrophenyl-α-D-mannopyranoside的酶解作用增強,且不被swainsonine抑制.用單抗6A8作探針行Western Blotting,見分子量為120KDa的蛋白帶,轉染6A8 cDNA的細胞的Western blotting信號明顯增強.120KDa蛋白與6A8 cDNA推測的編碼蛋白質的分子量相當.這表明6A8 cDNA編碼的蛋白質的確是一種α-甘露糖苷酶,可

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