化療聯(lián)合樹突狀細胞治療鼠源性肺癌的機制.pdf

1、研究目的：探討低劑量化療結(jié)合樹突狀細胞—DC免疫治療小鼠肺癌的效應機制。 方法：體外試驗：篩選導致3LL細胞30％凋亡的安素泰濃度；利用分離小室系統(tǒng)，分別設置mDC組，mDC和3LL組，mDC和低劑量安素泰組，mDC和經(jīng)低劑量安素泰誘導的凋亡3LL細胞組，分析上述4組DC細胞表面標志，對趨化因子MIP-1α，MIP-3β的趨化能力；體內(nèi)試驗：小鼠皮下接種3LL腫瘤細胞成瘤后，分設為空白對照組，低劑量安素泰化療組，DC組，低劑量安

2、素泰結(jié)合DC治療組，分別測量各組的腫瘤大小，各組腫瘤內(nèi)免疫組化染色檢測CD4+，CD8+T淋巴細胞的浸潤，各組小鼠內(nèi)引流淋巴結(jié)分泌INF-γ的含量以及應用微滲析結(jié)合Luminex的方法分析各組活體小鼠腫瘤內(nèi)細胞因子的含量變化。 結(jié)果：體外試驗證實：50nM的安素泰引起3LL細胞30％的凋亡率。50nM 的安素泰明顯地提高DC表面 CD11cCD80, CD11cCD86, CD11cCD40, CD11cCDIab表型，與mDC

3、組相比，差異具有統(tǒng)計學意義。3LL腫瘤細胞與DC共培養(yǎng)后抑制DC表面成熟表型標志CD11cCD86, CD11cCD40, CD11cCDIab的表達，與mDC組相比，差異具有統(tǒng)計學差異。而加入的50nM的安素泰部分逆轉(zhuǎn)3LL腫瘤細胞對DC的抑制作用，與mDC+3LL組DC相比，上調(diào)了DC表面CD11cCD40的表達，差異具有顯著性。另外，50nM安素泰逆轉(zhuǎn)3LL細胞抑制MIP-1α，MIP-3β對DC的趨化能力。體內(nèi)試驗顯示：低劑量安

4、素泰結(jié)合DC治療能明顯抑制腫瘤生長，其抑制腫瘤生長的作用較單純低劑量化療，單純DC免疫治療差別具有顯著性。低劑量化療聯(lián)合DC免疫治療抑制作用的產(chǎn)生基于引流淋巴結(jié)內(nèi)分泌高水平的INF-γ，瘤床內(nèi)CD4+，CD8+T淋巴細胞浸潤，以及腫瘤內(nèi)IP-10，MCP-1分泌增高相關(guān)。 結(jié)論：小劑量（50nM）濃度的安素泰具有對DC的保護和促進成熟的作用；此劑量的安素泰部分逆轉(zhuǎn)了受腫瘤抑制狀態(tài)的DC表型和功能；小劑量化療結(jié)合DC免疫治療能夠