維生素E對(duì)二硫化碳致雄性大鼠生殖系統(tǒng)病理結(jié)構(gòu)和凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)改變的拮抗作用.pdf

1、二硫化碳（Carbon disulfide，CS2）為脂溶性易揮發(fā)液體，作為工業(yè)上廣泛應(yīng)用的有機(jī)溶劑，它能損害生物體多個(gè)系統(tǒng)。既往研究已證實(shí)長(zhǎng)期接觸一定濃度的CS2對(duì)雄性生殖系統(tǒng)亦有毒性。研究者發(fā)現(xiàn)CS2暴露人群，睪丸明顯萎縮，生精系列細(xì)胞停止成熟，精子數(shù)減少，精子染色體畸變率增高。同時(shí)，CS2具有明顯的脂質(zhì)過氧化作用，且這種作用在許多毒性發(fā)生發(fā)展過程中具有重要的意義。本研究在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，利用抗氧化劑維生素E（VE）干預(yù)CS2染毒

2、雄性大鼠，觀察CS2致雄性大鼠睪丸、附睪、輸精管、前列腺及精囊腺組織病理結(jié)構(gòu)，凋亡相關(guān)蛋白（p53、Bcl-2、Fas、FasL）表達(dá)的改變和VE的拮抗作用，為探討CS2對(duì)男（雄）性生殖損傷的某些可能機(jī)制提供科學(xué)依據(jù)。 30只健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為三組:（1）CS2染毒組（1250mg/m3）：靜式吸入染毒，每天2h，每周5d，共10周；（2）對(duì)照組：條件相同吸入空氣；（3）CS2+VE組：VE拌入飼料中（250mg/

3、kg）。染毒結(jié)束后，取大鼠睪丸、附睪、輸精管、前列腺和精囊腺以HE染色、電鏡、Western blot及免疫組化法從不同角度來觀察VE對(duì)CS2致雄性大鼠生殖系統(tǒng)病理結(jié)構(gòu)和凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)改變的拮抗作用。 研究結(jié)果顯示： 1.HE染色。 CS2染毒組大鼠睪丸間質(zhì)水腫，曲細(xì)精管生精細(xì)胞數(shù)目及層次明顯減少；附睪管上皮細(xì)胞排列紊亂，有增生現(xiàn)象，細(xì)胞脫落明顯，管腔體積變小，管腔中精子數(shù)量減少；輸精管粘膜上皮扁平，排列整齊，乳突狀突

4、起消失，管腔擴(kuò)大，管腔中精子數(shù)量減少；前列腺腺泡擴(kuò)大，管壁變薄，皺褶減少，細(xì)胞排列尚正常；精囊腺組織病變不明顯。VE干預(yù)組組織病理改變較染毒組減輕。 2.電鏡。CS2染毒組睪丸支持細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞及各級(jí)生精細(xì)胞均出現(xiàn)胞漿空泡，其中精原細(xì)胞、初級(jí)精母細(xì)胞及精子細(xì)胞線粒體腫脹，精子尾部縱切面“9*2＋2”軸絲結(jié)構(gòu)紊亂，微管溶解缺失。VE干預(yù)組間質(zhì)細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，精原細(xì)胞、精母細(xì)胞胞漿可見輕度空泡，精母細(xì)胞線粒體輕度腫脹。 3.

5、Western blot CS2染毒組大鼠睪丸組織中p53、Bcl-2、Fas蛋白表達(dá)均上調(diào)，與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01和P<0.05），VE干預(yù)后表達(dá)明顯下降，與染毒組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。 4.免疫組化。 CS2染毒組大鼠附睪上皮細(xì)胞中p53、Bcl-2及Fas蛋白表達(dá)升高，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），VE干預(yù)后表達(dá)下降（P<0.01）。但FasL蛋白的表達(dá)水平較對(duì)照組及VE干預(yù)

6、組無明顯變化（P>0.05）。輸精管、前列腺和精囊腺上皮細(xì)胞中Fas蛋白表達(dá)升高，與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），VE干預(yù)后表達(dá)下降（P<0.01），但p53、Bcl-2及FasL蛋白的表達(dá)與對(duì)照組及VE干預(yù)組比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。 從以上結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，CS2吸入染毒可導(dǎo)致大鼠睪丸間質(zhì)水腫，曲細(xì)精管內(nèi)生精細(xì)胞數(shù)目及層次減少，各級(jí)生精細(xì)胞、支持細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)發(fā)生病理變化，同時(shí)可使附睪、輸精