長期接觸二硫化碳對大鼠腎臟的影響.pdf

1、目的:通過檢測長期接觸二硫化碳（carbon disulfide，CS2）大鼠的尿液指標(biāo)、血液生化指標(biāo)、腎組織病理形態(tài)學(xué)改變以及腎臟細胞凋亡、腎細胞中Bax蛋白表達，觀察CS2對大鼠腎臟損害情況，并探討其可能的發(fā)生機制，為預(yù)防和治療CS2中毒提供有效的實驗依據(jù)。
　　方法:選取80只健康SD大鼠，均為雄性，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機分為5組，正常組、空白組(0mg/kg)、低劑量CS2染毒組（50 mg/kg）、中劑量CS2染毒組（15

2、0 mg/kg）、高劑量CS2染毒組(250 mg/kg)，每組各16只。CS2溶于橄欖油后進行腹腔注射染毒，每天1次，每周5天，連續(xù)16周?？瞻捉M給予等量的橄欖油腹腔注射，正常組不予以任何處理。各組大鼠給予常規(guī)顆粒飼料喂養(yǎng)，自由飲水，每周固定時間稱重1次，并根據(jù)體重相應(yīng)調(diào)整染毒劑量。在染毒12、16周末，隨機抽取各組大鼠6只，將大鼠置于代謝籠中，收集24小時尿液標(biāo)本，對其尿蛋白、尿肌酐水平和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-ac

3、etyl-β-D-gluosaminidase，NAG酶)活性進行檢測。隨后將其處死，在心臟采血，對其腎功、肝功、血脂等生化指標(biāo)進行檢測，取腎組織標(biāo)本測定腎臟指數(shù)(計算方法:腎臟重量(g)/體重（kg）），固定并切片后蘇木素-伊紅（HE）染色觀察腎組織病理改變;采用TUNEL法檢測腎細胞凋亡百分數(shù);免疫組織化學(xué)法檢測Bax在腎細胞中表達情況。
　　結(jié)果:(1)隨著CS2染毒時間的延長，動物逐漸出現(xiàn)肌肉松弛、肌張力降低、步態(tài)異常等癥

4、狀，提示CS2中毒性損害已存在。(2)在12周末和16周末，與正常組和空白組比較，體重、腎臟指數(shù)、尿肌酐、尿NAG在中劑量組和高劑量組大鼠變化顯著(P＜0.05)，且尿NAG在低劑量組仍增加明顯(P＜0.05)。各染毒組間，高劑量組較低劑量組變化顯著(P＜0.05)，且尿NAG含量高劑量組較中劑量組增加明顯(P＜0.05)。(3)在16周末，與正常組和空白組大鼠比較，血清中SCr和BUN水平高劑量組和中劑量組均明顯增高(P＜0.05);

5、與低劑量組比較，高劑量組增高最明顯，有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)，中劑量組變化不明顯(P＞0.05);在12周末，血清中SCr和BUN水平變化不明顯(P＞0.05)。在12周末和16周末，與正常組和空白組比較，血清AST、TC、TG水平在高劑量組明顯增加(P＜0.05);中劑量組AST水平增加有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。各染毒組大鼠比較，AST水平高劑量組較低劑量組明顯增加(P＜0.05)。其余各組在時間上的變化不明顯(P＞0.05)

6、。(4) HE染色結(jié)果:各染毒組大鼠腎小管損傷隨染毒時間延長和染毒劑量增加而加重，所有高劑量組大鼠不同程度的腎小管損傷，部分中、低劑量組大鼠不同程度的腎小管損傷，16周末時腎臟病理評級高劑量組大鼠較正常組和空白組高（P＜0.05）。(5)腎細胞凋亡百分數(shù)隨染毒時間延長和染毒劑量增加而增加，12、16周末各染毒劑量組腎細胞凋亡率明顯高于正常組和空白組(P＜0.05)，各染毒劑量組組間比較有差異(P＜0.05)。(6)免疫組化顯示:BAX蛋