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1、本研究以雪青、綠寶石、西洋梨矮化砧木BA29的莖尖、莖段和BA29試管苗葉片為試材進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)器官培養(yǎng)研究。通過(guò)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),并結(jié)合DPS統(tǒng)計(jì)分析軟件包進(jìn)行方差分析、新復(fù)極差檢驗(yàn),著重研究雪青、綠寶石、BA29的莖尖無(wú)菌培養(yǎng)物建立、初代培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)和BA29的生根培養(yǎng)和葉片再生培養(yǎng)。結(jié)果表明: 1.對(duì)雪青、綠寶石、BA29采用4種不同消毒時(shí)間的處理,雪青最佳的消毒時(shí)間為8min,綠寶石和BA29最佳的消毒時(shí)間為5min。
2、2.對(duì)雪青、綠寶石選取3種大小的外植體,雪青和綠寶石選用0.5cm大小的莖段做為外植體較為合適。 3.雪青和BA29,用75%乙醇處理30S,再用0.1%升汞處理8min和直接用0.1%升汞處理8min兩種消毒處理方式相比,后者消毒處理方式較好。而綠寶石,兩種消毒處理方式?jīng)]有明顯區(qū)別。 4.在4月、5月、6月、7月采集綠寶石外植體,4月份為采集綠寶石外植體的最佳時(shí)期。通過(guò)對(duì)從田間采集的綠寶石外植體放入冰箱(4℃左右)4h
3、、在培養(yǎng)基中加入100mg/L VC和在培養(yǎng)基中加入2g/L PVP,后兩者對(duì)抑制綠寶石外植體褐變較好。 5.雪青、綠寶石和BA29初代培養(yǎng)基都宜采用MS+BA 1.0mg/L+IBA 0.1mg/L。 6.雪青芽增殖培養(yǎng)基宜采用MS+BA 2.0mg/L+IBA 0.1mg/L,綠寶石芽增殖培養(yǎng)基宜采用1/2MS+BA 1.0mg/L+IBA 0.1mg/L,BA29芽增殖培養(yǎng)基宜采用MS+BA1.0mg/L+IBA
4、0.1mg/L。 7.雪青和綠寶石繼代苗隨著培養(yǎng)基中GA<,3>(0mg/L,0.5mg/L,1.0mg/L,1.5mg/L)濃度的升高,芽苗的增殖倍數(shù)逐漸增加,且苗生長(zhǎng)正常。BA29繼代苗在培養(yǎng)基中加入0.5mg/L GA<,3>時(shí),增殖倍數(shù)增加,但GA<,3>增加到1.0mg/L和1.5 mg/L時(shí),增殖系數(shù)有所下降,且苗生長(zhǎng)不正常。 8.BA29的生根培養(yǎng)基宜采用1/2MS+IBA 1.0 mg/L+NAA 0.3
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