負(fù)載親水性抗癌藥物的絲蛋白納米微球.pdf

1、淋巴化療技術(shù)利用淋巴系統(tǒng)具有吞噬微粒的特點(diǎn)，將小分子的抗癌藥物與微粒結(jié)合后進(jìn)行局部注射以達(dá)到對(duì)淋巴轉(zhuǎn)移灶靶向給藥的目的，同時(shí)明顯降低了血中藥物濃度和全身毒副作用。蠶絲蛋白作為一種天然蛋白質(zhì)，不僅有突出的綜合力學(xué)性能，而且還具有良好的生物相容性、生物可降解性并且無(wú)免疫原性，加之來(lái)源充足、價(jià)格適中等諸多優(yōu)點(diǎn)，目前已被廣泛地應(yīng)用于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。本論文采用絲蛋白納米微球來(lái)負(fù)載傳統(tǒng)抗癌藥物氟尿苷(FUDR)和5-氟尿嘧啶(5-Fu)，探討了載藥微

2、球多方面的性能，以期將其應(yīng)用于淋巴化療中。
　　利用絲蛋白獨(dú)特的親疏水多嵌段共聚物結(jié)構(gòu)特征和構(gòu)象轉(zhuǎn)變機(jī)制，在乙醇誘導(dǎo)和冷凍協(xié)同作用下，成功地制備了結(jié)構(gòu)規(guī)整、分散性好且穩(wěn)定的負(fù)載氟尿苷的絲蛋白納米微球，整個(gè)工藝過(guò)程簡(jiǎn)單且制備過(guò)程中無(wú)需引入任何有毒試劑。我們發(fā)現(xiàn)，在載藥微球表面通過(guò)靜電作用吸附一層聚乙二醇分子后能有效提高微球的再分散能力及其儲(chǔ)存穩(wěn)定性。通過(guò)改變絲蛋白初始濃度和投藥量可以調(diào)節(jié)微球尺寸(210-510nm)和載藥量。載藥微

3、球的緩釋性能隨絲蛋白濃度的增大而得以提高，但投藥量對(duì)其基本沒(méi)有影響。當(dāng)初始絲蛋白濃度為40mg/mL時(shí)，微球的最大載藥量為6.8％，對(duì)應(yīng)的緩釋時(shí)間約為2天。通過(guò)體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)表明，即使在絲蛋白微球濃度較高（如1.0mg/mL）時(shí)，無(wú)論正常細(xì)胞293T還是Hela細(xì)胞的存活率都超過(guò)80％，表明由此自組裝方法制備得到的絲蛋白微球具有良好的生物相容性。通過(guò)觀察標(biāo)記有異硫氰酸熒光素的絲蛋白微球與Hela細(xì)胞共培養(yǎng)體系可知，絲蛋白微球能粘附于癌

4、細(xì)胞表面或進(jìn)入其內(nèi)部。進(jìn)一步考察載藥絲蛋白微球與Hela細(xì)胞共培養(yǎng)體系后發(fā)現(xiàn)，載藥微球能明顯抑制Hela細(xì)胞的增殖。
　　臨床上之所以用氟尿苷來(lái)部分替代5-氟尿嘧啶來(lái)進(jìn)行傳統(tǒng)的全身化療，是考慮到后者對(duì)正常細(xì)胞的毒性太大，但是如果能用載體負(fù)載藥物的形式來(lái)解決5-氟尿嘧啶毒副作用太大的問(wèn)題，可以避免藥物進(jìn)入體內(nèi)后再由衍生物到5-氟尿嘧啶轉(zhuǎn)化的復(fù)雜步驟，使藥效發(fā)揮得更直接有效。出于更好地利用這種傳統(tǒng)而廉價(jià)的抗癌藥物的目的，我們同樣采用絲