免疫金納米籠@CK19抗體探針對人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7靶向光熱治療及毒性的研究.pdf

1、目的:金屬納米顆粒具有光熱轉(zhuǎn)換效應(yīng),可將吸收的光能量轉(zhuǎn)化為熱能、進(jìn)而產(chǎn)生高溫殺滅腫瘤細(xì)胞?；诮鸺{米顆粒的光熱轉(zhuǎn)換特性,觀察經(jīng)Anti-CK19抗體鏈接的免疫金納米籠對人乳腺癌細(xì)胞MCF-7靶向光熱殺傷效應(yīng),通過體外實驗探討其對腫瘤細(xì)胞的殺傷作用及其毒性大小,有望為后期動物實驗及臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。
　　方法:金納米籠經(jīng)Anti-CK19抗體鏈接后制成探針使其具有生物靶向性,通過免疫組化方法檢測MCF-7細(xì)胞膜表面是否表達(dá)CK1

2、9抗原。將細(xì)胞分為兩組;實驗組(A組):將金納米籠-抗體探針鏈接細(xì)胞后,用功率密度為1.5 W/cm2、波長為808 nm的激光照射30 min;對照組BⅠ組:使用相同光照強度和波長的激光單純光照30 min而不加入金納米籠-抗體探針;對照組BⅡ組為單純加入金納米籠-抗體探針而無光照;對照組BⅢ組:無金納米籠無光照。觀察實驗組及對照組溫度隨時間變化曲線,通過熒光終止劑染色實驗組和對照組細(xì)胞以及運用流式細(xì)胞儀檢測免疫金納米籠對人乳腺癌細(xì)胞

3、 MCF-7的光熱殺傷作用。通過四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法觀察不同濃度的金納米籠-抗體探針對MCF-7細(xì)胞的毒性大小。
　　結(jié)果:通過細(xì)胞免疫組化證實MCF-7細(xì)胞膜表達(dá)CK19抗原。A組溫度升高明顯,光照5~6 min后便可從室溫22℃上升至48℃,后達(dá)到平衡;BⅠ組溫度無明顯變化,上升至35℃左右則不再變化;BⅡ與BⅢ組溫度無變化。通過熒光終止劑染色細(xì)胞以及流式細(xì)胞儀檢測實驗組和對照組的細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)實驗組細(xì)胞大量凋亡,而對照

4、組細(xì)胞活性基本未受影響(P<0.05)。MMT法結(jié)果顯示免疫金納米籠對MCF-7細(xì)胞毒性較小(P<0.05)。
　　結(jié)論:(1)通過免疫組化染色證實,CK19抗原主要存在人乳腺癌細(xì)胞系 MCF-7細(xì)胞膜表面;(2)免疫金納米籠對人乳腺癌細(xì)胞MCF-7具有靶向殺傷作用,且用功率密度為1.5 W/cm2、波長為808 nm的激光照射30 min后細(xì)胞死亡率可達(dá)87.9％;(3)濃度為10 mg/ml的免疫金納米籠對MCF-7細(xì)胞毒性影