版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、目的:構(gòu)建能夠表達(dá)具核梭桿菌外膜fomA蛋白的嗜酸乳桿菌,通過體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)評(píng)估其在預(yù)防牙周感染等方面的生物學(xué)效應(yīng)。
意義:以益生菌為載體、以阻斷菌斑生物膜的形成為目的、以口服為主要免疫途徑的牙周生態(tài)疫苗為牙周疾病的預(yù)防提供了新的思路。
方法:通過基因重組技術(shù)將具核梭桿菌的fomA基因重組至嗜酸乳桿菌的表達(dá)質(zhì)粒PMG36e中,通過電轉(zhuǎn)化將該重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至嗜酸乳桿菌中,WesternBlot技術(shù)鑒定目的蛋白的表達(dá)。通過抑菌
2、及細(xì)菌粘附等實(shí)驗(yàn)分析fomA蛋白對(duì)嗜酸乳桿菌基本特性的影響,藥敏實(shí)驗(yàn)確保其生物安全性。將一定濃度重組菌經(jīng)口腔方式灌喂小鼠,ELISA檢測血清及小腸盥洗液中特異性抗體水平。具核梭桿菌經(jīng)fomA抗體處理后與牙齦卟啉單胞菌共培養(yǎng),通過MTT、上皮細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)以及構(gòu)建小鼠牙周膿腫模型等實(shí)驗(yàn),測試fomA抗體在干擾具核梭桿菌與牙齦卟啉單胞菌共聚中的作用。最后,用具核梭桿菌與牙齦卟啉單胞菌混合菌液在被免疫小鼠下頜唇側(cè)牙齦處制備牙齦膿腫模型,通過膿腫
3、大小及炎性因子水平來衡量口服重組菌對(duì)降低小鼠牙周感染風(fēng)險(xiǎn)的作用。
結(jié)果:
1.成功構(gòu)建了能夠表達(dá)可溶性具核梭桿菌外膜蛋白的重組嗜酸乳桿菌。
2.除粘附性稍有增加外,該重組菌的菌落形態(tài)、生長狀態(tài)、抑菌性、藥物敏感性等生化特性沒有隨著外源fomA蛋白的分泌而發(fā)生改變,仍然具有可靠的生物安全性。
3.小鼠口服表達(dá)fomA抗原的重組菌后,可在小鼠血清及腸液中檢測到fomA特異性抗體。
4.fom
4、A特異性抗體可以在體外抑制具核梭桿菌與牙齦卟啉單胞菌的共聚,并可減輕混合菌液引起小鼠牙周組織炎癥反應(yīng)的程度。
5.口服重組菌的小鼠,牙齦膿腫狀況較對(duì)照組輕微,血清中炎性因子IL-1β水平也較對(duì)照組低。
結(jié)論:嗜酸乳桿菌ATCC4356菌株可以穩(wěn)定的表達(dá)外源fomA可溶性蛋白,外源fomA蛋白的表達(dá)不會(huì)引起嗜酸乳桿菌的基本性質(zhì)的改變。FomA蛋白在具核梭桿菌與牙齦卟啉單胞菌的共聚中發(fā)揮重要作用??诜亟M嗜酸乳桿菌可以誘
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 嗜酸乳桿菌素的初步研究.pdf
- 嗜酸乳桿菌發(fā)酵乳的研究.pdf
- 嗜酸乳桿菌發(fā)酵豆乳工藝及其凝膠特性的研究.pdf
- 嗜酸乳桿菌微膠囊的制備及其抗逆性評(píng)價(jià).pdf
- 嗜酸乳桿菌共軛亞油酸異構(gòu)酶基因的表達(dá)研究.pdf
- 具核梭桿菌黏附和侵入上皮細(xì)胞的初步研究.pdf
- 嗜酸乳桿菌生理特性及其凍干工藝的研究.pdf
- 復(fù)方嗜酸乳桿菌片與酪酸梭菌活菌散的區(qū)別淺析
- 海洋源嗜酸乳桿菌肽聚糖的免疫效應(yīng)及機(jī)理研究.pdf
- 嗜酸乳桿菌生物學(xué)特性及其在發(fā)酵乳中的應(yīng)用研究.pdf
- 嗜酸乳桿菌發(fā)酵大豆分離蛋白的特性及其對(duì)面包品質(zhì)的影響.pdf
- 嗜酸乳桿菌的微膠囊化研究.pdf
- 嗜酸乳桿菌亞油酸異構(gòu)酶的研究.pdf
- 谷物蛋白肽對(duì)嗜酸乳桿菌的促生長作用及其抗氧化活性研究.pdf
- 具核梭桿菌促進(jìn)大腸癌發(fā)生的相關(guān)性研究.pdf
- 嗜酸乳桿菌產(chǎn)共軛亞油酸及其乳制品的研究.pdf
- 嗜酸乳桿菌增菌培養(yǎng)基的研究.pdf
- 嗜酸乳桿菌所產(chǎn)細(xì)菌素特性的研究.pdf
- 嗜酸乳桿菌發(fā)酵豆乳降血脂功能的研究.pdf
- 嗜酸乳桿菌活菌制劑開發(fā)研究.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論