SHP2在喉癌中的表達及其生物學(xué)作用研究.pdf

1、目的:
　　明確臨床喉癌樣本中SHP2的表達水平及其與喉癌患者預(yù)后的關(guān)系，評價SHP2作為喉癌預(yù)后判斷指標的價值。探討SHP2對喉癌細胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移等惡性生物學(xué)行為的影響。
　　方法:
　　利用Real-Time PCR、western-blot和免疫組織化學(xué)方法檢測喉癌臨床組織樣品中SHP2的表達情況并運用統(tǒng)計學(xué)方法分析SHP2的表達與臨床病理和預(yù)后資料的相關(guān)性;在體外實驗，利用慢病毒感染的方法建立干擾SHP2的

2、喉癌Hep2細胞系及其對照細胞系;利用Hep2-shSHP2及其對照細胞系分別采用增殖實驗、穿膜實驗和侵襲實驗等方法觀察干擾SHP2表達后對喉癌細胞系增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移能力等生物學(xué)行為的影響;在體內(nèi)實驗，將上述穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系接種裸鼠，觀察SHP2對喉癌細胞在裸鼠體內(nèi)成瘤能力的影響。
　　結(jié)果:
　　1、從轉(zhuǎn)錄水平、蛋白水平和組織學(xué)水平證實SHP2在喉癌細胞中表達顯著高于癌旁，在喉癌的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中SHP2的表達尤為增高。
　　

3、2、通過對帶有詳細病理資料和預(yù)后情況的喉癌組織芯片進行SHP2的免疫組織化學(xué)染色實驗并評分，統(tǒng)計分析得出喉癌中SHP2表達與預(yù)后呈負相關(guān)，SHP2表達水平越高，患者總體生存期越差。
　　3、通過增殖實驗、穿膜實驗和侵襲實驗等分子生物學(xué)方法發(fā)現(xiàn)，干擾SHP2表達后喉癌細胞系生長能力、侵襲能力和遷移能力明顯減弱。
　　4、通過體內(nèi)荷瘤實驗發(fā)現(xiàn)干擾Shp2后裸鼠腫瘤形成能力明顯低于對照組。
　　結(jié)論:
　　本課題研究首