miR-27a與e-cadherin在胃癌腹膜高轉(zhuǎn)移細胞系GC9811-P中表達分析的研究.pdf

1、學位論文獨創(chuàng)性聲明學位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得直昌太堂或其他教育機構(gòu)的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名(手寫)：鄉(xiāng)甲暉簽字日期：工，l弓年6月3日學位論文作者簽名(手寫)：鄉(xiāng)孓、卑簽

2、字日期：工，l弓年6月3日學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解南昌大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，有權保留并向國家有關部門或機構(gòu)送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權南昌大學可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編本學位論文。同時授權中國科學技術信息研究所和中國學術期刊(光盤版)電子雜志社將本學位論文收錄到《中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫》和《中國優(yōu)秀博碩士學位

3、論文全文數(shù)據(jù)庫》中全文發(fā)表，并通過網(wǎng)絡向社會公眾提供信息服務。(保密的學位論文在解密后適用本授權書)一學位論文作者簽名(手寫)：鯽落導師簽名(手寫)：聊以彳?！尽炞秩掌冢簆l弓年易月3日簽字日期：乙I弓年‘月專日摘要率；各實驗組均采用RTPCR、WesternBlot、MSP、實時定量PCR技術分別檢測EcadherinmRNA和蛋白、Ecadherin基因啟動子區(qū)域甲基化、miR27a的表達量，比較各組間它們的表達差異。4、利用M

4、TT法評價各處理組GC9811P細胞的增殖情況；通過流式細胞儀觀察各處理組GC9811P細胞凋亡情況。結(jié)果：1、在三種胃癌細胞中，實時定量PCR結(jié)果顯示GC9811P細胞的miR27a表達量最高(尸O05)；RTPCR和WesternBlot結(jié)果顯示GC9811P細胞的EcadherinmRNA和蛋白表達水平最低儼005)：MSP結(jié)果顯示GC9811P細胞的Ecadherin啟動子區(qū)域甲基化表達水平最高(尸O05)。2、antagomi

5、r瞬時轉(zhuǎn)染胃癌腹膜高轉(zhuǎn)移細胞GC9811P的轉(zhuǎn)染效率可達到60％。轉(zhuǎn)染組和空白對照組及陰性對照組比較，miR27a表達明顯降低儼O05)，EcadherinmRNA和蛋白表達顯著上調(diào)(尸O05)，Ecadherin啟動子區(qū)域基因高甲基化得到逆轉(zhuǎn)儼O05)。3、MTT法檢測到轉(zhuǎn)染組的GC9811P細胞增殖速度，明顯低于空白對照組、陰性對照組(尸005)；轉(zhuǎn)染組的CPIR(細胞增殖抑制率)明顯大于陰性對照組儼005)，且在轉(zhuǎn)染36h后最大。

6、4、流式細胞儀結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染組的GC9811P細胞系凋亡細胞率明顯高于其它兩組(P005)。結(jié)論：1、三種胃癌細胞中胃癌腹膜高轉(zhuǎn)移性細胞株GC9811P的miR27a表達最高，Ecadherin表達量最低，Ecadherin基因啟動子區(qū)域甲基化狀態(tài)最明顯；2、下調(diào)胃癌GC9811P細胞的miR27a表達，能逆轉(zhuǎn)Ecadherin基因啟動子區(qū)域高甲基化，恢復Ecadherin表達；miR27a能調(diào)控Ecadherin基因啟動子區(qū)域甲基化過程