大劑量激素對髖關(guān)節(jié)周圍骨影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景和目的；臨床上激素性股骨頭壞死(Steroid-induced Osteonecrosis of the Femoral Head，ONFH)多見，致殘率高，分析其發(fā)病機(jī)制有著非常重要的臨床意義。激素性股骨頭壞死行人工關(guān)節(jié)置換治療較其它原因行人工關(guān)節(jié)置換治療，其翻修率最高。本實(shí)驗(yàn)旨在研究大劑量甲強(qiáng)龍(糖皮質(zhì)激素)所致股骨頭壞死的發(fā)病機(jī)制及其對髖臼、股骨頭、股骨近端組織學(xué)及BMP-2表達(dá)的影響。 材料和方法：新西蘭成年大白兔2

2、4只，雌雄不限，體重2.7-3.1kg平均體重2.9kg，隨機(jī)分為A組即對照組6只，B、C組為實(shí)驗(yàn)組，每組9只。 1．實(shí)驗(yàn)方法：人劑量激素對髖關(guān)節(jié)周圍骨影響的實(shí)驗(yàn)研究①對照組：A組兔每次肌注3ml生理鹽水；實(shí)驗(yàn)組：B組、C組分別肌注甲強(qiáng)龍40mg/kg體重。B組每天一次，連續(xù)3天：C組每天一次，連續(xù)6天。②于實(shí)驗(yàn)前及實(shí)驗(yàn)第2、4、8周晨采集空腹血各2ml，采集前禁食12h。③A組兔隨機(jī)處死2只，B組、c組兔隨機(jī)處死3只，切取1c

3、m×1cm×0.5cm大小的肝臟組織及雙側(cè)髖臼、股骨頭、小轉(zhuǎn)子高度水平切取約3mm厚的股骨近端段。 2．檢測指標(biāo)： ①空腹血檢測血清總膽固醇及甘油三酯。 ②肝臟組織行組織切片HE染色觀察病理變化。 ③髖臼、股骨頭、股骨近端段骨標(biāo)本脫鈣，石蠟包埋并切片，用于HE染色觀察病理變化、BMP-2的SABC法免疫組化染色，觀察BMP-2的表達(dá)情況。 結(jié)果 1、血脂的變化實(shí)驗(yàn)與對照組血清總膽固醇及甘油

4、三酯實(shí)驗(yàn)前相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；對照組血清總膽固醇及甘油三酯在8周內(nèi)變化無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；實(shí)驗(yàn)組從第2周始至第8周，血清總膽固醇及甘油三酯均高于對照組(P<0.01)。 2．病理學(xué)變化2．1肝臟病理學(xué)變化HE染色，光鏡觀察。A組肝臟組織正常，肝小葉、肝索、肝竇結(jié)構(gòu)等清晰，肝細(xì)胞無腫脹現(xiàn)象。B、C組在實(shí)驗(yàn)第2周時肝細(xì)胞濁腫；實(shí)驗(yàn)第4周時，肝細(xì)胞內(nèi)可見脂肪空泡(在HE切片制片過程中脂肪全部被溶解而形成空泡)，肝索

5、結(jié)構(gòu)不清，肝竇變窄；實(shí)驗(yàn)第8周時，肝細(xì)胞內(nèi)可見大小不等的脂肪空泡，胞體腫脹，胞核被壓至一邊，呈氣球樣變，肝索結(jié)構(gòu)不清，肝竇變窄不易辨認(rèn)。激素的應(yīng)用總量越大、時間越長，越明顯。 2．2骨病理學(xué)變化HE染色，光鏡觀察。A組骨小梁排列規(guī)則整齊，致密飽滿，骨細(xì)胞清晰可見，核較大、位于中央，髓腔增生活躍，造血細(xì)胞、血管豐富，各時間點(diǎn)無明顯變化。B、C組可見2周時股骨頭，股骨近端骨皮質(zhì)和骨小梁中空虛的骨陷窩增多，骨小梁變細(xì)、稀疏，髓腔內(nèi)造血

6、細(xì)胞減少，髖臼骨變化不明顯；4周股骨頭，股骨近端骨可見少量骨質(zhì)和骨髓出現(xiàn)典型的壞死、溶解，髓腔內(nèi)造血細(xì)胞減少，破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞均少見，空骨陷窩進(jìn)一步增多，骨小梁纖細(xì)、紊亂；髖臼骨變化不明顯；8周時股骨頭，股骨近端髓腔內(nèi)造血細(xì)胞顯著減少，破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞少見，血管的數(shù)量和直徑均降低，空骨陷窩十分多見，骨小梁斷裂，骨皮質(zhì)較薄；髖臼骨可見皮質(zhì)和骨小梁中空虛的骨陷窩稍增多。 3．BMP-2免疫組化染色：A組不同時期均可見骨組織及細(xì)胞

7、大片被染成褐色，顏色較深，時間點(diǎn)問無明顯區(qū)別；B、C組2周時與A組情況大致相同或染色深度略有降低，而2個實(shí)驗(yàn)組在4、8周隨著用藥時間延長骨組織中被染成褐色的區(qū)域及細(xì)胞逐漸減少甚至個別標(biāo)本中無染成褐色區(qū)域，同時也可以看到同一時期隨著用藥量的加大染成褐色的區(qū)域面積降低，隨著用藥時間的延長及用藥量的增大，染色深度也同時呈降低趨勢。A、B、C三組BMP-2染色的平均光密度組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01)，兩兩比較各組的差異亦具有統(tǒng)計學(xué)意義；