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文檔簡介
1、本文的研究目的是利用康寧木霉(konningkiitrichoderma3.2774)和白腐真菌(phanerochaetechrysosporium5.776)對秸稈液態(tài)混合發(fā)酵條件的優(yōu)化,對影響產(chǎn)生纖維素和木質(zhì)素降解酶的因素如原料配比,發(fā)酵時(shí)間,生長因子,初始pH值,加水量,接種方式及發(fā)酵過程中酶活性變化規(guī)律進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。初步確定了發(fā)酵液中各單糖的種類。具體方法及研究結(jié)果如下: 1用酸水解結(jié)合DNS法測定秸桿中纖維素,半
2、纖維素,木質(zhì)素和可溶性還原糖含量。測定結(jié)果如下:纖維素32%,半纖維素18.9%,木質(zhì)素15%,可溶性還原糖0.27%。2利用正交試驗(yàn)確定最佳培養(yǎng)基組成為秸稈:麩皮為5∶1,硫酸銨1.4%,硫酸鎂0.05%,磷酸二氫鉀0.05%,硫酸亞鐵0.01%,硫酸錳0.01%,加水量為100%,溫度30℃,通氣量170rpm,pH為6.5。 3利用正交試驗(yàn)確定最佳接種時(shí)間間隔及各自接種量:接種時(shí)間間隔為48小時(shí),混合菌的接種比例相同即同為
3、3%。 4麩皮添加量為0.01%,過氧化物酶活可提高56.1%。 5金屬離子Fe2+對FPA酶活有顯著的提高作用,Mn2+對CMC,POD酶活的提高有顯著作用。Fe2+,Mn2+添加量0.01%。 6NaCl對纖維素酶活的影響較為顯著,由于在液體環(huán)境中菌體迅速利用培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì),使培養(yǎng)基中滲透壓降低,為防止細(xì)胞內(nèi)外滲透壓過大而影響細(xì)胞正常生長,在培養(yǎng)基中加入適量NaCl,由此可能使得細(xì)胞的通透性增大,從而導(dǎo)致
4、酶活力增大。結(jié)果表明,添加0.5%NaCl較為適宜混合菌生長 7培養(yǎng)時(shí)間對不同菌株產(chǎn)酶能力影響不同,將康寧木霉與白腐真菌混合液態(tài)培養(yǎng)一段時(shí)間后,分別測定濾紙酶活力,羧甲基纖維素酶及過氧化物酶活力。通過對液體發(fā)酵培養(yǎng)基及發(fā)酵條件的優(yōu)化,混合菌的產(chǎn)酶高峰期由3天縮短為2天,最高酶活力FPA酶為2.451U(umol/ml.min),CMC酶為1.724U(umol/ml.min),分別比優(yōu)化以前提高了67.93%,8.6%;POD酶
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