元寶槭葉生化特性研究.pdf

1、本文首次對(duì)元寶槭葉的生化特性進(jìn)行了比較系統(tǒng)的研究。在測(cè)定元寶槭葉主要生化成分的基礎(chǔ)上，研究了元寶槭葉多酚類化合物提取工藝和測(cè)定方法，探明元寶槭葉功能性和生物活性成分提取工藝和純化方法，并進(jìn)一步分析比較元寶槭葉70％乙醇提取物、純化后的黃酮及綠原酸的抗氧化能力；比較元寶槭葉不同季節(jié)，不同葉位的生化成分含量；測(cè)定元寶槭葉中重金屬含量，分析其是否富集重金屬，初步進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評(píng)價(jià)，為綜合開(kāi)發(fā)利用元寶槭葉提供理論依據(jù)。結(jié)果表明： 1.不同葉

2、位的元寶槭葉，有效成分含量最高的為葉片，其次為全葉，而葉柄的利用價(jià)值最低。不同季節(jié)的元寶槭葉，有效成分含量最高的隨年發(fā)育周期而不同，游離氨基酸、水浸出物等以春季嫩葉的含量最高。 2.元寶槭葉基礎(chǔ)生化成分較豐富，總灰分含量在5.3％～8.0％之間，其中水溶性灰分和酸溶性灰分含量較高，可被利用的礦質(zhì)元素含量高；粗纖維含量葉片中含量遠(yuǎn)低于葉柄，最低是春季嫩葉為6.84％；水浸出物含量中以春季嫩葉含量最高，達(dá)39.99％，隨春季葉片的成

3、熟而含量略有降低，夏季又有所上升，達(dá)39.89％，而到秋季時(shí)又有所降低。 3.元寶槭葉中游離氨基酸總量以春季嫩葉的含量最高，達(dá)1.5％左右，其次為春季成葉(柄)。隨葉片成熟度的增加而游離氨基酸含量逐漸降低，到秋季時(shí)幾乎完全分解。 4.Folin試劑法測(cè)定酚類化合物總量最佳條件：最大吸收波長(zhǎng)在700±10nm之間，F(xiàn)olin試劑與堿液之比為4∶1(v∶v)，體積分別為6mL、1.5mL，反應(yīng)溫度為50℃，反應(yīng)時(shí)間為15mi

4、n，酚類化合物濃度為0～14μg/mL，回收率為92.2％～103.2％。 丙酮—水體系的總酚含量高于水浸出物中總酚含量；元寶槭葉多酚類的最大浸提量以50％丙酮為溶劑，溫度50℃，提取2次，每次2h時(shí)獲得；元寶槭葉片多酚類化合物總量在16.79％～23.67％之間，其中春季嫩葉含量最高。 5.元寶槭葉黃酮的提取純化工藝：70％乙醇，70℃，冷凝回流提取2次，每次2h→氯仿萃取3次脫脂→取水層以乙酸乙酯萃取3次→元寶槭黃酮

5、粗提取液→取乙酸乙酯層真空減壓濃縮→聚酰胺樹(shù)脂柱層析。聚酰胺樹(shù)脂柱層析，以70％乙醇為洗脫劑，提取液pH為4～5時(shí)純化處理效果較好。 元寶槭葉黃酮含量總體來(lái)說(shuō)較高，夏季葉片粗黃酮含量最高，達(dá)8.71％，其次為秋季葉片，為5.48％。相同時(shí)期的葉片中黃酮含量高于葉柄，但隨季節(jié)變化的趨勢(shì)均是春季未成熟前含量較高，到春季成熟后含量有所降低，而至夏季升至最高，秋季時(shí)含量又略有降低。純化后黃酮含量最高為夏季葉片，為4.05％。純化產(chǎn)品得率

6、在42％～77％之間。 6.元寶槭葉綠原酸提取純化工藝：70％乙醇，70℃，冷凝回流提取2次，每次2h→氯仿萃取3次脫脂→40％堿性醋酸鉛沉淀分離得到黃綠色沉淀→以5％硫酸，調(diào)pH為3過(guò)濾得清夜→乙酸乙酯萃取→取水層真空減壓濃縮。 綠原酸含量較高，尤其是春季未成熟的嫩葉，含量達(dá)到了2.46％。綠原酸含量隨時(shí)片的成熟有所降低，到夏季時(shí)又有所升高，然后隨葉片的老化而略有減少。葉柄綠原酸含量的變化趨勢(shì)略有不同：春季未成熟樣含量較高，到

7、成熟直至夏季含量逐漸減少，但到秋季則升高較多，粗品綠原酸達(dá)1.85％，純化后的樣則有1.07％，純化產(chǎn)品得率約為50％～60％。 7.元寶槭葉黃酮對(duì)羥基自由基的清除力最強(qiáng)，各黃酮樣品的清除力均大于Vc，春季成葉黃酮的·OH清除力最強(qiáng)，為0.200mg/mL。其次為70％乙醇提取物，除夏季葉片外，其他70％乙醇提取物樣品對(duì)羥基自由基的50％清除率均高于0.5％Vc，秋季葉片的清除率最強(qiáng)，IC50為0.571mg/mL，其次為春季成

8、熟葉片，然后是夏柄。而綠原酸對(duì)羥基自由基的清除力較弱。 相同濃度下，樣品的吸光值越高，則還原力越強(qiáng)。70％乙醇提取物還原力最強(qiáng)，其次為純化后的黃酮類化合物，最低的為純化后的綠原酸。同一時(shí)期葉片還原力大于葉柄。 8.元寶槭葉對(duì)重金屬無(wú)富集作用。 可見(jiàn)元寶槭葉生化成分含量豐富，富含礦質(zhì)元素，水浸出物含量較高，尤其富含多酚類化合物。元寶槭多酚中的黃酮類化合物，綠原酸等含量高于一般植物，提取純化率高，抗氧化功能等生物活性