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文檔簡(jiǎn)介
1、[目的]
1.調(diào)查莒南縣人群血清硼、鉻、錳、鈷、鎳、砷、硒、鎘、鉈、鉛等元素的水平和分布特征。
2.分析莒南縣人群血清硼、鉻、錳、鈷、鎳、砷、硒、鎘、鉈、鉛等元素含量與高血壓病、糖尿病、冠心病以及慢性胃炎等慢性疾病的相關(guān)性,探討血清十種元素含量與高血壓、糖尿病、冠心病以及慢性胃炎等慢性病之間的關(guān)系。
3.分析年齡、性別、個(gè)人行為習(xí)慣等各種因素對(duì)人體血清中元素含量及慢性病的影響。
4.揭示血清中硼、
2、鉻、錳、鈷、鎳、砷、硒、鎘、鉈、鉛含量及其分布特點(diǎn)與高血壓、糖尿病、冠心病、慢性胃炎等常見慢性疾病發(fā)病的內(nèi)在關(guān)系。
5.為莒南縣人群血清元素與常見慢性病研究提供基礎(chǔ)資料,根據(jù)課題研究結(jié)果為人群進(jìn)一步隨訪監(jiān)測(cè)及有效干預(yù)提供依據(jù)。
[方法]
1.調(diào)查
用整群抽樣法隨機(jī)從莒南縣抽取六個(gè)自然村,以所有常住戶口居民作為調(diào)查對(duì)象,采用入戶問卷調(diào)查的方法對(duì)選定調(diào)查對(duì)象進(jìn)行調(diào)查。
2.體檢與取血
3、 在調(diào)查同時(shí),對(duì)調(diào)查對(duì)象進(jìn)行健康查體,體檢內(nèi)容包括身高、體重、血壓等各項(xiàng)生理指標(biāo)。對(duì)受檢者進(jìn)行取血采樣,將受調(diào)查者的3mL抗凝血以1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5-10分鐘,吸取血清置于Eppeddorf管中,密封編號(hào)低溫運(yùn)輸保存。
3.血清元素的測(cè)定
在確定的儀器條件和樣品處理方法下,對(duì)電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)測(cè)定血清微量元素進(jìn)行方法學(xué)檢驗(yàn),分別計(jì)算出檢出限、精密度、相對(duì)誤差、加標(biāo)回收率。用0.1%Triti
4、on-X-100和0.5%NH4OH對(duì)血清稀釋10倍后直接用ICP-MS進(jìn)行分析,采用外標(biāo)法進(jìn)行儀器的工作曲線校準(zhǔn),將樣品處理后,采用碰撞池電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)法依次分批測(cè)定血清中十種元素含量,測(cè)定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)(10倍)即為血清中該元素濃度。
4.血值測(cè)定
利用血清總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白-膽固醇試劑盒,根據(jù)規(guī)定的條件和步驟用比色法測(cè)定其含量,血清低密度脂蛋白-膽固醇采用間接計(jì)算法定量。<
5、br> 5.質(zhì)量控制
從調(diào)查取樣、實(shí)驗(yàn)室各指標(biāo)測(cè)定到數(shù)據(jù)錄入整個(gè)流程均需做好質(zhì)量控制。調(diào)查前確定調(diào)查對(duì)象的選取原則,調(diào)查時(shí)做好問卷調(diào)查、體檢、樣品采集的質(zhì)量控制。實(shí)驗(yàn)室測(cè)定過程中做質(zhì)量控制圖將室內(nèi)變異控制在允許的范圍內(nèi),測(cè)定血生化指標(biāo)時(shí)每測(cè)定30個(gè)樣品作一對(duì)質(zhì)控血清,測(cè)定血清微量元素時(shí)每測(cè)定40個(gè)樣品重新擬合一條標(biāo)準(zhǔn)曲線。所有的反應(yīng)試劑都小心的控制污染,整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程均使用超純水稀釋,做好樣品收集過程的質(zhì)量控制。
6
6、.數(shù)據(jù)處理
建立數(shù)據(jù)庫(kù)并錄入調(diào)查及實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),對(duì)研究所需數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理;統(tǒng)計(jì)分析均用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS20.0處理,數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示,所用的統(tǒng)計(jì)方法有兩樣本t檢驗(yàn)、卡方檢驗(yàn)、方差分析、兩因素相關(guān)性檢驗(yàn)、非條件Logistic多元回歸分析;其中P<0.05被認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
[結(jié)果]
1.對(duì)碰撞池電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)法測(cè)定血清中10種元素含量進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證,結(jié)果顯示該方法
7、能夠滿足血清中元素的分析要求。其中B、Mn、Co、As、Ni、Se、Cd、Tl、Pb和Cr的檢出限分別為0.200μg/L、0.005μg/L、0.038μg/L、0.004μg/L、0.037μg/L、0.363μg/L、0.392μg/L、0.042μg/L、0.001μg/L、0.002μg/L;各元素的低、中、高加標(biāo)回收率為85%~115%;各元素的低、中、高日內(nèi)精密度均優(yōu)于5%;各元素的低、中、高日間精密度均優(yōu)于15%;相對(duì)誤
8、差平均值分別為0.92%、6.46%、8.65%、4.50%、6.36%、8.42%、2.56%、6.85%、9.03%、5.45%;各元素的相關(guān)系數(shù)r均優(yōu)于0.99。
2.莒南縣人群血清中硼、鉻、錳、鈷、鎳、砷、硒、鎘、鉈、鉛元素平均分布水平為:B46.97±32.32μg/L,Cr1.99±1.02μg/L,Mn3.73±3.52μg/L,Co0.34±0.84μg/L,Ni6.26±4.03μg/L,As5.48±4.6
9、7μg/L,Se111.70±27.48μg/L,Cd1.33±1.03μg/L,Tl0.04±0.06μg/L,Pb3.30±3.24μg/L。男性血清中Mn含量和Se含量均高于女性,女性血清中Co含量高于男性,差異具有顯著性(P<0.05)。血清B含量在男性和女性中都隨著年齡的增大而增高;女性血清Co含量均高于同齡別男性;血清Se含量隨著年齡增加有增高趨勢(shì),男性血清Se含量均高于同齡別女性;男性血清Cd含量隨年齡增大有增高趨勢(shì),女性
10、血清Cd的年齡差異不明顯,60歲以上年齡組血清Cd含量男性高于女性。血清Cr、Ni、As、T1、Pb在各年齡、性別間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,其含量隨年齡和性別的變化不顯著。
3.經(jīng)完全隨機(jī)兩樣本之間的統(tǒng)計(jì)學(xué)比較,高血壓病人與對(duì)照人群之間的年齡、身高、體重、BMI、每日吃鹽量、TG、TC、LDL-c、HDL-c有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。高血壓病人組平均年齡、體重、腰圍顯著高于正常對(duì)照組,血清TG、TC、HDL-c、LDL-c也明顯高于正常對(duì)照人群。用
11、卡方檢驗(yàn)對(duì)兩組性別比例、飲酒率、吸煙率、喝茶率進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)高血壓組男性占44.60%,而正常組的男性占39.81%,高血壓患者的吸煙率、飲酒率、喝茶率均高于正常人群。高血壓病人血清Se和B含量高于正常對(duì)照人群,其他元素兩組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)血清元素含量與血壓值進(jìn)行相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)血清中B和Se含量與收縮壓之間存在弱相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為0.065和0.139;血清中B和Se含量與舒張壓之間也存在相關(guān)性,相關(guān)系數(shù)分別為0.054和0.1
12、41。Logistic多元回歸分析發(fā)現(xiàn),每日吃鹽量、文化程度、高血壓家族史、喝茶、BMI水平、血清中Co和Se的含量與是否為高血壓差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),每日高鹽攝入、高血壓家族史、喝茶、高BMI、血清Se含量為高血壓的危險(xiǎn)因素,高文化程度和血清Co為保護(hù)因素
4.對(duì)糖尿病組和對(duì)照組人群的相關(guān)指標(biāo)做兩獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn),結(jié)果表明,病例組和對(duì)照組之間的年齡、身高、BMI、腰圍及血糖都有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。血清元素分析結(jié)果顯示糖尿
13、病組和對(duì)照組人群血清中B、Cr、Mn、Ni、Se和Cd的含量有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),糖尿病組B、Mn、Ni、Se、Cd在血清中的含量均高于對(duì)照組,而Cr在血清中的含量低于對(duì)照組。Logistic回歸分析結(jié)果顯示,高齡、糖尿病家族史、高BMI、血清Mn、Se、Cd為危險(xiǎn)因素,血清Cr為保護(hù)因素。
5.對(duì)冠心病與血清元素含量及其他影響因素的Logistic回歸分析結(jié)果顯示,高齡、冠心病家族史、高BMI是冠心病的危險(xiǎn)因素,血清
14、中Co含量是冠心病的保護(hù)因素
6.對(duì)慢性胃炎與血清元素含量的Logistic多元回歸分析發(fā)現(xiàn),血清Cr是慢性胃炎的危險(xiǎn)因素,血清Se是慢性胃炎的保護(hù)因素。
7.分別對(duì)吸煙組、飲酒組、喝茶組血清中十種元素含量與對(duì)照組做兩獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn),分析結(jié)果顯示,吸煙組血清Se含量和Pb含量均高于對(duì)照組;飲酒組血清Mn和Se含量高于對(duì)照組,血清Co含量低于對(duì)照組;喝茶組血清Cr含量高于對(duì)照組,血清Cd含量低于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)
15、意義(P<0.05)。
[結(jié)論]
1.通過對(duì)碰撞池ICP-MS法測(cè)定血清中10種元素含量進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證,該方法的精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍和最低檢測(cè)限都達(dá)到了臨床要求,結(jié)果顯示該方法能夠滿足測(cè)定需求。
2.莒南縣人群血清中硼、鉻、錳、鈷、鎳、砷、硒、鎘、鉈、鉛元素平均分布水平為:B46.97±32.32μg/L,Cr1.99±1.02μg/L,Mn3.73±3.52μg/L,Co0.34±0.84μg/L,N
16、i6.26±4.03μg/L,As5.48±4.67μg/L,Se111.70±27.48μg/L,Cd1.33±1.03μg/L,T10.04±0.06μg/L,Pb3.30±3.24μg/L;男性血清中Mn和Se的含量明顯高于女性;血清中Se含量隨著年齡的增大,有增高的趨勢(shì),其中男性血清Se含量高于同齡別女性,Co在正常人群女性血清中含量明顯高于男性。
3.高血壓人群的年齡、體重、BMI、TG、TC、LDL-c、吸煙率、飲
17、酒率、喝茶率和每日食鹽量均高于一般人群;高血壓人群B和Se含量高于正常對(duì)照人群;高BMI、高齡、遺傳因素、血清Se可能為高血壓的危險(xiǎn)因素。
4.糖尿病人群的B、Mn、Ni、Se、Cd在血清中的含量均高于對(duì)照組,而Cr在血清中的含量低于對(duì)照組。高齡、糖尿病家族史、高BMI、血清Mn、Se、Cd為糖尿病的危險(xiǎn)因素,血清Cr為保護(hù)性因素。
5.高齡、冠心病家族史、高BMI是冠心病的危險(xiǎn)因素,Co可能是冠心病的保護(hù)因素。
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