人臍血間質(zhì)干細胞趨向胃癌種植瘤及其分子機制的實驗研究.pdf

1、目的：研究人臍血間質(zhì)干細胞對胃癌組織的趨向性并探討其分子機制。 方法：(1)動物實驗形態(tài)學(xué)觀察人臍血間充質(zhì)干細胞在裸鼠各組織中的分布：裸鼠腹股溝皮下注射人SGC-7901胃癌細胞建立胃癌種植瘤模型，熒光染料SP-DiI染色人臍血間質(zhì)干細胞及成纖維細胞，分組注射到對側(cè)腹股溝皮下。10天后處死裸鼠，取出腫瘤、注射部位、肝臟、脾臟和肺臟組織，連續(xù)切片分別制成冰凍切片和常規(guī)HE染色，熒光顯微鏡下觀察冰凍切片中間質(zhì)干細胞和成纖維細胞在各器

2、官中的分布。(2)用RT-PCR方法測定人胃癌細胞SGC-7901、MGC80-3、人大腸癌細胞HT-29各種癌細胞中CXCR4 mRNA表達，及人臍血間質(zhì)干細胞SDF-1 mRNA的表達，探討CXCR4/SDF-1軸在癌細胞和間質(zhì)干細胞相互趨化運動中的作用。(3)用熒光定量PCR及免疫組化方法了解CXCR4/SDF-1軸在人胃癌組織和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移間的作用：取40例臨床手術(shù)切除的胃癌組織、胃正常粘膜及胃周腫大淋巴結(jié)，分別測定胃癌組織和胃正

3、常粘膜中CXCR4 mRNA及胃周腫大淋巴結(jié)中SDF-1 mRNA的表達。 結(jié)果：(1)腫瘤組織內(nèi)見到大量紅色染料標記的人臍血間質(zhì)干細胞，注射部位、肝臟、脾臟及肺臟中未發(fā)現(xiàn)間質(zhì)干細胞存在，紅色熒光物質(zhì)在腫瘤切片中所占得比例與其它部位切片相比有顯著性差異(P<0.05)；成纖維細胞主要集中于注射部位，其它臟器中未發(fā)現(xiàn)存在；(2)熒光定量PCR結(jié)果顯示胃癌組織中CXCR4-mRNA的表達(1.624±1.380)明顯強于胃正常粘膜組

4、(1.072±0.524)(P<0.05)；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織CXCR4-mRNA的表達(0.823±0.551)強于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織(0.392±0.338)(P<0.05)，有胃癌轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)中SDF-1-mRNA的表達(0.5432±0.4907)明顯強于無胃癌轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)(0.2640±0.2601)(P<0.05)；有胃癌轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)中SDF-1表達和相應(yīng)胃癌組織中CXCR4的表達量高度相關(guān)(r=0.776，p<0.

5、01)：(3)免疫組化結(jié)果顯示CXCR4在胃癌中的陽性率為70.0％，正常胃粘膜中的陽性率為27.5％，兩組相比有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，CXCR4的表達水平與分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Borrmann分型和臨床分期密切相關(guān)(P<0.05)，與病人的年齡、性別、腫瘤的大小和腫瘤部位無關(guān)(P>0.05)；SDF-1于有胃癌轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中的表達陽性率為75.0％，無胃癌轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)中的陽性率為27.5％，兩組相比有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

6、 結(jié)論：(1)人臍血間質(zhì)干細胞在動物體內(nèi)能趨向到胃癌組織中，利用此特性可望將其作為載體應(yīng)用到胃癌的診斷和治療上；(2)癌細胞表達CXCR4，間質(zhì)干細胞和淋巴細胞表達SDF-1，符合CXCR4/SDF-1軸中趨化因子SDF-1和其受體CXCR4相互趨化吸引的規(guī)律；(3)CXCR4/SDF-1軸在胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮了重要作用，CXCR4和SDF-1之間的相互吸引作用導(dǎo)致了胃癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，為間質(zhì)干細胞的趨向運動分子機制提供了佐