橘核質(zhì)量及檸檬苦素類似物純化工藝的研究.pdf

1、橘核為蕓香科植物橘Citrus reticulata Blanco及其栽培變種的干燥成熟種子，具有理氣，散結(jié)，止痛的功效，現(xiàn)代臨床主要用于治療急性乳腺炎、乳腺增生等疾病，效果顯著，其藥用價(jià)值受到重視。《中國(guó)藥典》2010年版僅收載了橘核的“性狀”、“橫切面鑒別”等項(xiàng)，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)尚不完善;研究表明橘核的主要有效組分為檸檬苦素類似物，該類化合物藥理作用明確，具有良好的開發(fā)前景，但目前關(guān)于檸檬苦素類似物純化工藝的研究較少，提取物純度過低。本課題

2、為進(jìn)一步完善橘核藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)獲取高純度的檸檬苦素類似物，主要對(duì)以下幾個(gè)方面進(jìn)行了研究:
　　1.橘核藥材質(zhì)量研究:①建立了HPLC法同時(shí)測(cè)定橘核有效成分檸檬苦素、諾米林含量。②對(duì)收集的18批不同產(chǎn)地、不同品種（椪柑、福橘）的橘核樣品進(jìn)行了檸檬苦素、諾米林的含量測(cè)定:建議將檸檬苦素和諾米林收載到橘核質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下作為“含量測(cè)定”的指標(biāo)成分，按橘核干燥品計(jì)算，橘核藥材含檸檬苦素不得少于0.49％，諾米林不得少于0.28％，完善了

3、橘核藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。③首次對(duì)橘核不同炮制品進(jìn)行了含量測(cè)定:炮制后檸檬苦素、諾米林的含量均有所下降，下降程度由大到小的排列順序依次是鹽炙＞清炒＞麩炒，完善了橘核飲片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。④為探討不同果期的橘核中檸檬苦素、諾米林的變化規(guī)律，課題組對(duì)10月～次年2月的福橘種子中檸檬苦素、諾米林的含量變化進(jìn)行了監(jiān)測(cè):隨著福橘果實(shí)的不斷成熟，10月至12月底期間檸檬苦素和諾米林的含量均有不同程度的升高，自次年1月開始兩者含量開始下降，直至果期結(jié)束。⑤對(duì)椪柑

4、、福橘的種子進(jìn)行顯微定量鑒別:福橘和椪柑種子中草酸鈣方晶的長(zhǎng)徑、短徑均存在顯著性差異(P＜0.05)，通過對(duì)草酸鈣方晶大小的比較可初步區(qū)分椪柑和福橘的種間差異。⑥為更全面的反映橘核藥材中所含化學(xué)成分的種類和含量，本課題首次對(duì)橘核藥材的HPLC指紋圖譜進(jìn)行了研究，完善了橘核藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):建立了橘核藥材的HPLC指紋圖譜共有模式圖，共標(biāo)定11個(gè)共有峰，其中指認(rèn)4號(hào)峰為橙皮苷，9號(hào)峰為檸檬苦素，10號(hào)峰為諾米林;同時(shí)對(duì)18批橘核藥材指紋圖譜

5、的相似度進(jìn)行了評(píng)價(jià)，相似度均在0.90以上，具有較好的一致性，說明生成的對(duì)照?qǐng)D譜可作為橘核藥材的鑒別標(biāo)準(zhǔn)。
　　2.檸檬苦素類似物純化工藝研究:①通過靜態(tài)吸附解吸實(shí)驗(yàn)，從16種樹脂中篩選出了最佳樹脂，然后針對(duì)篩選出的HPD-722型大孔樹脂的上樣條件（上樣濃度、上樣流速、上樣pH值）、洗脫條件（洗脫劑濃度、洗脫劑pH值、洗脫流速、洗脫劑用量）進(jìn)行了系統(tǒng)的考察，優(yōu)化后的純化工藝參數(shù)為:上樣濃度在3.50 mg·mL-1～5.50 m

6、g·mL-l、上樣流速為1～2BV/h，pH在6左右;用1BV的蒸餾水溶液清洗;最佳洗脫溶劑為80％乙醇溶液，洗脫流速為2BV/h，洗脫液pH值為7，洗脫體積為6BV。②本課題采用最優(yōu)的純化工藝可得到較高純度的檸檬苦素類似物固形物:檸檬苦素類似物含量可達(dá)80％以上，檸檬苦素含量20％以上，諾米林含量40％以上;對(duì)固形物中大孔樹脂各物質(zhì)的殘留量進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果表明各物質(zhì)的殘留量均符合《中國(guó)藥典》2010年版二部附錄Ⅷ中限量要求，為進(jìn)一步應(yīng)