ERCC1，HMGA2在Ⅰ-Ⅲ期NSCLC中的表達(dá)及與臨床預(yù)后的關(guān)系.pdf

1、肺癌是各種癌癥死亡的首要原因，5年生存率約15％。在I-III期手術(shù)切除的非小細(xì)胞肺癌中，鉑類輔助化療可提高患者的總體生存期，但輔助化療在延長(zhǎng)個(gè)體患者的生存期作用仍有限，且化療副作用大，因此迫切需要一些指標(biāo)預(yù)測(cè)哪些患者能從鉑類輔助化療中獲益，既提高療效又減少化療毒副作用。 鉑類藥物的細(xì)胞毒機(jī)制是鉑類藥物與DNA形成鏈間或鏈內(nèi)交聯(lián)，損傷DNA，最終引起腫瘤細(xì)胞凋亡。核苷酸切除修復(fù)途徑(nucleotideexcisionrepai

2、rNER)是DNA交聯(lián)損傷的主要修復(fù)途徑。其中錯(cuò)配切除交叉互補(bǔ)修復(fù)酶1(excisionrepaircross-complementationgroup1，ERCC1)是NER限速酶，因此ERCC1表達(dá)可能與鉑類耐藥有關(guān)，可能用于預(yù)測(cè)早期非小細(xì)胞肺癌的鉑類輔助化療療效。 高遷移率族蛋白A(highmobilitygroupA2HMGA2)是與染色體結(jié)合的非組蛋白，含3個(gè)AT-溝DNA結(jié)合域及1個(gè)酸性尾巴，能與DNA結(jié)合使其彎曲、

3、拉伸、成環(huán)或解鏈而更有利于與轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，或與轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄活性，故又稱建筑轉(zhuǎn)錄因子，在調(diào)節(jié)基因表達(dá)，病毒的整合，胚胎分化，細(xì)胞轉(zhuǎn)化，腫瘤發(fā)生進(jìn)展等生物過(guò)程中有重要作用。最近研究顯示HMGA與癌癥發(fā)生進(jìn)展密切相關(guān)。HMGA基因重組不僅是人類良性間充質(zhì)腫瘤的重要特征，HMGA蛋白在細(xì)胞轉(zhuǎn)化也起關(guān)鍵作用，并發(fā)現(xiàn)HMGA蛋白過(guò)度表達(dá)在人類許多惡性腫瘤如乳腺癌，胰腺癌，甲狀腺癌，口腔鱗癌，白血病且與惡性腫瘤生長(zhǎng)分化，轉(zhuǎn)移有關(guān)，可作為預(yù)

4、后差的指標(biāo)。但目前具體機(jī)制不很明確，目前關(guān)于HMGA2在NSCLC表達(dá)及其生存期的相關(guān)性研究尚少。 ERCC1基因位于19q13.2-q13.3，HMGA2基因位于12q14-15，HMGA2可調(diào)節(jié)大量基因轉(zhuǎn)錄。有報(bào)道在體外HMGA2下調(diào)ERCC1啟動(dòng)子活性，抑制NER，導(dǎo)致基因不穩(wěn)定，增加腫瘤易感性。但在體內(nèi)HMGA2蛋白表達(dá)與ERCC1蛋白表達(dá)之間的關(guān)系尚無(wú)報(bào)道。 為此本試驗(yàn)探討ERCC1在I-III期NSCLC的表

5、達(dá)及對(duì)術(shù)后鉑類輔助化療效果的影響，HMGA2在I-III期可切除NSCLC患者中表達(dá)及兩者在體內(nèi)表達(dá)的關(guān)系?，F(xiàn)分三部分闡述如下。 第一部分:ERCC1在I-III期非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及對(duì)術(shù)后鉑類輔助化療影響 目的：在I-III期手術(shù)切除的非小細(xì)胞肺癌中，鉑類輔助化療可提高患者的總體生存期，但目前尚缺乏有效的生物預(yù)后因子預(yù)測(cè)個(gè)體患者是否從輔助化療獲益，本研究探討ERCC1在I-III期NSCLC患者體內(nèi)的表達(dá)及對(duì)術(shù)后鉑類

6、輔助化療效果的影響。 方法：59例肺癌根治術(shù)的NSCLC病理標(biāo)本，其中男性43例，女性16例，年齡32-77歲，中位年齡58歲；肺腺癌28例，肺鱗癌27例，腺鱗癌4例，參照UICC1997年TNM分期，I期17例，II期24例，III期18例。手術(shù)后鉑類輔助化療。應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP方法檢測(cè)病理組織標(biāo)本中的ERCC1的表達(dá)。療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)是總生存期OS(overallsurvival)。ERCC1表達(dá)陽(yáng)性與陰性病例的比較采用X2檢

7、驗(yàn)，生存情況描述用Kaplan-Meier生存率曲線，組間比較用Log-Rank檢驗(yàn)，影響生存期的相關(guān)因素分析采用COX多因素回歸分析法。比較ERCC1表達(dá)對(duì)I-III期NSCLC手術(shù)并術(shù)后輔助化療患者的生存期的影響。 結(jié)果： ①ERCC1主要在細(xì)胞核內(nèi)均勻分布，一些腫瘤細(xì)胞的胞質(zhì)中也有表達(dá)。 ②59例患者ERCC1表達(dá)陽(yáng)性組31例(52.5％)。 ③ERCC1陽(yáng)性組的OS是612天，陰性組是1100天，

8、Kaplan-Meier生存曲線顯示ERCC1陰性組在陽(yáng)性組之上，Log-Rank檢驗(yàn)，兩者生存差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.019)④COX多因素回歸示TNM分期(X2=6.552,P=0.038)和ERCC1表達(dá)(HR=0.36,P=0.015)是本組患者的獨(dú)立預(yù)后因子。 結(jié)論：I-III期NSCLCERCC1表達(dá)陰性組可從鉑類輔助化療中獲益，ERCC1可作為獨(dú)立預(yù)后因子。 第二部分:HMGA2在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及

9、其臨床意義 目的：HMGA2是與染色體結(jié)合的非組蛋白，在許多惡性腫瘤中高表達(dá)，并與預(yù)后有關(guān)，本研究探討HMGA2在NSCLC患者中的表達(dá)的臨床特征及其意義。 方法：采用免疫組化SP法檢測(cè)59手術(shù)切除例非小細(xì)胞肺癌組織，10例非腫瘤組織中HMGA2表達(dá)。采用X2檢驗(yàn)，Kaplan-Meier生存曲線和COX回歸分析，比較與HMGA2表達(dá)相關(guān)因素及其對(duì)生存期的影響。 結(jié)果： ①免疫組織化學(xué)顯示HMGA2在78

10、％(46/59)NSCLC組織中表達(dá)，HMGA2主要在細(xì)胞核內(nèi)分布。一些腫瘤細(xì)胞的胞質(zhì)中也有微弱著色，并觀察到散在的支氣管上皮基底細(xì)胞核也有表達(dá)。而10例非腫瘤組織中均不表達(dá)，兩者比較有顯著性差異(X2=23.39P=0.000)。 ②HMGA2蛋白表達(dá)與NSCLC患者臨床病理特征之間的關(guān)系不同的腫瘤組織學(xué)類型，患者年齡，性別，吸煙史間HMGA2表達(dá)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但不同的腫瘤TNM分期，原發(fā)腫瘤大小，淋巴結(jié)

11、轉(zhuǎn)移狀態(tài)間有顯著性差異(P<0.05)。I期患者的表達(dá)率52.9％，II期患者的表達(dá)率87.5％，III期患者的表達(dá)率88.9％，組間比較有顯著性差異(P=0.013)，可見(jiàn)HMGA2表達(dá)水平與TNM分期有關(guān)，且分期越高，表達(dá)率越高。無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移HMGA2表達(dá)率59.1％，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移HMGA2表達(dá)率89.2％，兩者也有顯著性差異(P=0.007)。 ③HMGA2表達(dá)與生存期之間的關(guān)系HMGA2陰性表達(dá)患者中位生存期1034天，

12、而陽(yáng)性表達(dá)患者692天。由Kaplan-Meier生存曲線看出HMGA2陰性表達(dá)患者的生存曲線雖在陽(yáng)性表達(dá)患者之上，但是Log-rank檢驗(yàn)，兩者總體生存無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.183)，將患者年齡，性別，病理類型，TNM分期，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，腫瘤大小，HMGA2表達(dá)狀態(tài)采用COX模型多因素回歸分析，發(fā)現(xiàn)只有TNM分期是影響本組患者預(yù)后的獨(dú)立因素(X2=6.48P=0.039)。 結(jié)論：HMGA2在非小細(xì)胞肺癌中呈過(guò)度表達(dá)，并與TNM

13、分期，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。但不能作為獨(dú)立預(yù)后因素。 第三部分：HMGA2，ERCC1在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)相關(guān)性 目的：探討非小細(xì)胞肺癌體內(nèi)ERCC1蛋白表達(dá)與HMGA2蛋白表達(dá)的關(guān)系。 方法：應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP方法檢測(cè)59例I-III期NSCLC患者的腫瘤組織中ERCC1及HMGA2的表達(dá)。采用非參數(shù)方法Spearman相關(guān)分析兩者蛋白表達(dá)相關(guān)性。 結(jié)果：Spearman等級(jí)相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)兩者表達(dá)相關(guān)系數(shù)是

14、rs=0.232,P值是0.077，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：I-III期非小細(xì)胞肺癌患者ERCC1蛋白表達(dá)與HMGA2蛋白表達(dá)無(wú)相關(guān)性。 總結(jié)： 本文采用免疫組織化學(xué)SP方法檢測(cè)I-III期手術(shù)后并行鉑類輔助化療的非小細(xì)胞肺癌患者體內(nèi)ERCC1的表達(dá)及其與OS的關(guān)系，HMGA2的表達(dá)及其與OS的關(guān)系。ERCC1蛋白表達(dá)與HMGA2蛋白表達(dá)的相關(guān)性。發(fā)現(xiàn)I-III期NSCLCERCC1表達(dá)陰性組可從鉑類輔助化療中獲益