Ppif基因在NRK細胞體外缺血再灌注模型中的表達研究.pdf

1、目的：建立穩(wěn)定的體外大鼠腎小管上皮細胞(NRK cells)缺血再灌注模型，尋找建立模型的最佳條件。并驗證大鼠Ppif基因在該模型中的表達。
　　 方法：體外培養(yǎng)大鼠腎小管上皮細胞，以氧糖剝奪(krebs)液及使用去氧劑連二亞硫酸鈉(Na2S2O4)來模擬體外腎小管上皮細胞缺血再灌注，Annexin V/PI染色后，流式細胞儀檢測細胞凋亡率，用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)方法檢測Ppif基因(CypD的編碼基因)的mRNA

2、表達。
　　 結(jié)果：去氧去糖40 min再復氧復糖后，NRK細胞凋亡率于16 h達到最高值(P<0.05)。Ppif mRNA在再復氧0 h時，Ppif mRNA有基礎(chǔ)水平的表達，4 h開始升高，8 h時表達水平明顯升高，隨再灌注時間延長，表達量逐漸增高，再灌注16 h時達高峰，48 h開始回落，各時段與0 h比較，均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論：本模型可以模擬體內(nèi)缺血再灌注機制，去氧去糖40 min后再復