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1、目的:體外培養(yǎng)11天胚齡鼠(E11)的中腦前體細胞(ventralmeseneephalieprecursor,VMP),對其在自我更新、增殖分化等特點進行研究。方法:取受孕11天近交系大鼠胚胎的腹側(cè)中腦細胞,第一天在維持培養(yǎng)液(P1液)中培養(yǎng),第2-7天在增殖培養(yǎng)液(P2液)中培養(yǎng),第8-14天在分化培養(yǎng)液(D液)中培養(yǎng),每天對細胞進行觀察并計數(shù),使用免疫熒光細胞染色法分析前體細胞分化情況,并對不同胎齡鼠胚來源中腦前體細胞的細胞特性進
2、行比較。結(jié)果:E11神經(jīng)干細胞可在體外大量培養(yǎng),第1-5天細胞生長較慢,5天以后細胞呈幾何倍增,其在特定細胞因子的作用下可分裂、復(fù)制及增殖分化,同時表達新生細胞特異性抗原nestin等,細胞群體使用免疫熒光染色顯示除可見VMP外,還可見大量的神經(jīng)元(包括多巴胺能神經(jīng)元)和星形膠質(zhì)細胞等。與其他胎齡的胚胎來源細胞相比胚齡11天的最好。結(jié)論:近交系SD大鼠中腦前體細胞能夠在體外擴增并分化,并以胚齡11天的腹側(cè)中腦前體細胞的增殖分化能力最強,
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