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文檔簡介
1、ErbB2是具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白,屬于表皮生長因子受體家族,在多種癌細(xì)胞特別乳腺癌中有高表達(dá),針對(duì)其的單克隆抗體具有潛在的治療效果。本實(shí)驗(yàn)室自行研制的抗ErbB2嵌合抗體chA21具有抑制高表達(dá)ErbB2乳腺癌細(xì)胞生長的作用。本論文從chA21的大規(guī)模純化生產(chǎn)工藝、質(zhì)量研究以及工藝改進(jìn)進(jìn)行了研究: 1、以填充床生物反應(yīng)器大規(guī)模培養(yǎng)CHO工程細(xì)胞株表達(dá)的上清為原料,采用親和層析、凝膠過濾除鹽、陽離子交換層析、分子篩等步驟
2、,分離純化嵌合抗體chA21,建立大規(guī)模純化工藝。該工藝能有效解決抗體純化過程形成的多聚體問題,去除內(nèi)毒素和DNA殘留;可以確保每批純化10L~20L培養(yǎng)上清,蛋白總回收率大于50%,純度可達(dá)98%。 2、按照國家對(duì)生物制品的質(zhì)量要求,對(duì)大規(guī)模生產(chǎn)的chA21原液產(chǎn)品進(jìn)行了全面鑒定和質(zhì)量控制,主要包括含量鑒定、純度和雜質(zhì)污染物的檢測、理化性質(zhì)鑒定、生物學(xué)活性測定等。鑒定結(jié)果表明制備的chA21產(chǎn)品符合動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床試驗(yàn)的要求。
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