SecinH3對(duì)小鼠膿毒癥導(dǎo)致的肺損傷的治療作用以及機(jī)制的研究.pdf

1、急性肺損傷是常見于ICU的臨床綜合征，并導(dǎo)致較高的死亡率。它常常發(fā)生在sepsis患者中。在膿毒癥導(dǎo)致的急性肺損傷的發(fā)病過程中，微血管滲漏，以及肺水腫，能夠加重疾病的嚴(yán)重程度。在這個(gè)過程中，一個(gè)顯著的特征是血管內(nèi)皮細(xì)胞屏障的破壞，通透性增高。
　　 內(nèi)皮細(xì)胞之間的緊密連接和細(xì)胞粘附在內(nèi)皮屏障中起著重要的作用，很多研究者針對(duì)細(xì)胞連接，發(fā)現(xiàn)了很多重要的信號(hào)通路，以及改善通透性的藥物，但是在嚴(yán)重的肺損傷中，不僅是細(xì)胞連接遭到破壞，內(nèi)皮

2、細(xì)胞本身的損傷或者凋亡也會(huì)導(dǎo)致通透性增加。因此保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞免受損傷，是降低通透性的一項(xiàng)基礎(chǔ)的手段。一種cytohesin Arf-GEFs的抑制劑，secinH3，通過阻斷Arf6的激活，從而增強(qiáng)了細(xì)胞之間的連接。但是SecinH3對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞是否有保護(hù)作用，則沒有文獻(xiàn)報(bào)道，因此，在本文中，我們?cè)谛∈竽摱景Y導(dǎo)致肺損傷的模型中，應(yīng)用cytohesion的抑制劑，secinH3，來治療膿毒癥導(dǎo)致的肺損傷，觀察他是否對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞有保護(hù)作用，以及它

3、對(duì)血管通透性以及肺損傷的影響。
　　 研究方法:
　　 小鼠分成2組，假手術(shù)組和CLP組，研究CLP導(dǎo)致的膿毒癥對(duì)肺的影響，以確定CLP導(dǎo)致肺損傷的模型的效果。觀察小鼠的一般情況，血?dú)夥治?，肺的順?yīng)性，以及肺的病理切片，和死亡率。
　　 2小鼠隨機(jī)分成4組:假手術(shù)組，CLP組，SecinH3低劑量組，SecinH3高劑量組。以確定SecinH3是否能降低通透性，減輕肺水腫。觀察制表位:小鼠血?dú)夥治?，肺的順?yīng)性，以

4、及肺的病理切片，和死亡率。蛋白，細(xì)胞，水分的泄露的情況。以及肺內(nèi)的促炎因子的水平。
　　 3.上述四個(gè)組在術(shù)后24小時(shí)取材后檢測(cè)肺臟的內(nèi)皮細(xì)胞的狀態(tài)，透射電鏡和血液中vWF的水平。超氧化物歧化酶，丙二醛等氧化應(yīng)激的指標(biāo)，同時(shí)檢測(cè)Nrf-2的表達(dá)。在體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，用LPS作為損傷因素，研究SecinH3對(duì)LPS處理的內(nèi)皮細(xì)胞的影響，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞的凋亡。并且在體內(nèi)和體外研究用SOD的抑制劑DDC研究SecinH3的

5、作用。
　　 結(jié)果:
　　 1.CLP術(shù)后，小鼠的呼吸功能，肺的順應(yīng)性大幅惡化。死亡率大幅增加，肺的HE染色顯示，CLP術(shù)后，小鼠的肺內(nèi)病理?yè)p傷嚴(yán)重，肺泡腔內(nèi)滲出大量的細(xì)胞。肺泡間隔增寬。
　　 2.在CLP導(dǎo)致的肺損傷模型中，SecinH3可以提高了術(shù)后小鼠的肺呼吸功能，小鼠的血?dú)夂晚槕?yīng)性都得到改善，并且肺的病理切片也得到了改善。肺的白細(xì)胞，全細(xì)胞滲出，以及濕干比。促炎因子的檢測(cè)表明:肺內(nèi)的TNF和IL-6沒有

6、下降。
　　 3.在術(shù)后肺的電鏡顯示:小鼠肺臟的內(nèi)皮細(xì)胞的內(nèi)皮細(xì)胞在CLP術(shù)后，腫脹嚴(yán)重。但是SecinH3可以改善內(nèi)皮細(xì)胞的腫，保護(hù)內(nèi)皮屏障。在SecinH3使用后，血液中vWF的水平也出現(xiàn)大幅下降。進(jìn)一步的研究表明，SecinH3可以增加SOD的活性，減輕MDA的量。減少了內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡。免疫印跡實(shí)驗(yàn)表明:SecinH3是通過增強(qiáng)Nrf-2的表達(dá)從起到減輕氧化應(yīng)激的效果，Nrf-2是抗氧化中的重要的因子。SOD的抑制劑DDC

7、的實(shí)驗(yàn)證明:DDC可以阻斷SecinH3的抗氧化作用。
　　 結(jié)論:
　　 1.CLP模型可以導(dǎo)致急性肺損傷，該損傷模型對(duì)肺的大體功能和微觀病理都有較大的影響，是較好的肺損傷的模型。
　　 2.SecinH3可以減輕急性肺損傷后的細(xì)胞滲出蛋白滲出以及肺水腫，降低肺的通透性。但是不能減低肺內(nèi)促炎因子的水平。
　　 3.SecinH3通過調(diào)節(jié)Nrf-2的表達(dá)，增加SOD的活性，減輕了氧化應(yīng)激，從而保護(hù)了內(nèi)皮細(xì)