烏司他丁對(duì)膿毒癥早期肺損傷保護(hù)作用的研究.pdf

1、研究背景:膿毒癥是感染引起的全身炎癥反應(yīng)綜合癥(SIRS),膿毒癥發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中過(guò)度的炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)以及氧化應(yīng)激反應(yīng)導(dǎo)致多臟器功能受損,其中最常受累及的靶器官是肺臟。膿毒癥導(dǎo)致的急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合癥(ALI/ARDS)是是膿毒癥患者死亡的主要原因。烏司他丁(UTI)是一種胰蛋白酶抑制劑,具有抑制蛋白酶活性、消除炎癥因子、清除氧自由基等作用,從而對(duì)于多種因素導(dǎo)致的臟器功能損害具有保護(hù)作用。血紅素加氧酶(heme oxygenas

2、e,HO)是血紅素分解代謝過(guò)程中的限速酶,在機(jī)體的氧化應(yīng)激過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。目前尚不清楚UTI可否影響膿毒癥大鼠肺組織血紅素加氧酶-1(HO-1)及誘導(dǎo)性一氧化氮合酶(iNOS)的表達(dá),從而減輕炎癥反應(yīng)。
　　研究目的:1.研究烏司他丁對(duì)膿毒癥早期肺損傷保護(hù)作用,2.烏司他丁治療后肺組織中HO-1表達(dá)的變化。
　　研究方法:雄性Wistar大鼠隨機(jī)分成3組,假手術(shù)組、膿毒癥組和UTI組。除假手術(shù)組外,其余均采取盲腸結(jié)扎穿

3、孔(CLP)法制造膿毒癥模型。術(shù)后分別于0h和12h靜脈注射烏司他丁5萬(wàn)U/kg(UTI組)或等量生理鹽水(膿毒癥組),于6h、12h、24h處死大鼠,留取肺組織,HE染色觀察肺組織病理變化,應(yīng)用免疫組織化學(xué)法、westem blot法測(cè)定HO-1和iNOS蛋白變化,用Realtime PCR法測(cè)定HO-1和iNOS mRNA水平的變化。
　　結(jié)果:①大鼠肺組織HE染色可見,較假手術(shù)組,膿毒癥組和UTI組大鼠肺組織可見明顯組織腫脹

4、,肺泡間隔增厚,炎性細(xì)胞浸潤(rùn),甚至出現(xiàn)肺不張,膿毒癥組隨時(shí)間增加,上述改變加重,UTI組各時(shí)間點(diǎn)大鼠肺組織上述病理變化較膿毒癥組各時(shí)間明顯減輕。②免疫組化分析HO-1、iNOS蛋白表達(dá)顯示,各時(shí)間點(diǎn)亞組膿毒癥組蛋白表達(dá)均明顯高于假手術(shù)組,而UTI組較膿毒癥組有所下降。③westernblot法分析HO-1蛋白的表達(dá),各時(shí)間點(diǎn)膿毒癥組蛋白表達(dá)均明顯高于假手術(shù)組,而UTI組較膿毒癥組有所下降;而iNOS蛋白表達(dá)僅在24小時(shí)亞組出現(xiàn)差異。④較

5、假手術(shù)組,6h、12h、24h膿毒癥組肺組織HO-1 mRNA(1.7277±0.42073,1.7998±0.38334,1.7820±0.44001)明顯升高,UTI組HO-1mNRA(1.1013±0.25486,1.2612±0.30818,1.0995±0.25727)較膿毒癥組明顯下降(F=19.262,20.626,20.924,P＜0.05);6h、12h、24h膿毒癥組肺組織iNOSmRNA(4.3964±3.7882

6、5,5.0171±0.71085,4.3331±1.19443)明顯升高,而6h、12hUTI組肺組織iNOS mRNA表達(dá)較膿毒癥組無(wú)差異,僅24hUTI組肺組織iNOSmRNA(2.0500±0.32206)表達(dá)較膿毒癥組減少(F=64.640,P＜0.05)。
　　結(jié)論:膿毒癥發(fā)生急性肺損傷時(shí)可誘導(dǎo)肺組織HO-1和iNOS的產(chǎn)生,UTI能夠抑制炎癥因子的過(guò)度釋放,改善氧化應(yīng)激水平,從而間接下調(diào)HO-1和iNOS的表達(dá),減輕了