綿羊非繁殖季節(jié)產(chǎn)羔性狀的QTL分析.pdf

1、綿羊季節(jié)產(chǎn)羔導(dǎo)致母羊利用率低下，這是現(xiàn)代綿羊高效養(yǎng)殖的一個(gè)瓶頸。國內(nèi)外研究表明綿羊產(chǎn)羔性狀是受多基因控制的數(shù)量性狀，其遺傳力相對較低。運(yùn)用常規(guī)的育種技術(shù)來進(jìn)行改良，周期比較長，且難以進(jìn)行早期選擇。定位綿羊非繁殖季節(jié)產(chǎn)羔性狀的QTL，為利用分子育種解決這一難題提供了可行方案。本研究以常年發(fā)情的德國肉用美利奴羊?yàn)楦副?、季?jié)性發(fā)情的中國美利奴羊?yàn)槟副?，產(chǎn)生雜交F1，通過F1公羊與母羊互交產(chǎn)生在非繁殖季節(jié)產(chǎn)羔性狀方面存在差異的F2，構(gòu)建了用于綿

2、羊非繁殖季節(jié)產(chǎn)羔性狀QTL分析的資源群體。利用微衛(wèi)星和自主開發(fā)的綿羊EST-SSR，構(gòu)建了資源群體的連鎖圖譜。通過測定非繁殖季節(jié)母羊血清中孕酮分泌量的變化及對母羊非繁殖季節(jié)產(chǎn)羔能力的評分，利用最小二乘線性回歸分析，運(yùn)行GRIDQTL軟件對綿羊非繁殖季節(jié)性狀相關(guān)的QTL進(jìn)行定位分析，為綿羊非繁殖季節(jié)產(chǎn)羔性狀主效基因的定位及相關(guān)基因的分析奠定基礎(chǔ)。試驗(yàn)取得的結(jié)果如下：
　　1.本研究選用德國肉用美利奴公羊20只與季節(jié)性發(fā)情的中美母羊2

3、200只作為親本，進(jìn)行雜交試驗(yàn)，獲得F1留種公羊20只，母羊1850只，F(xiàn)2母羊490只、BC160只，合計(jì)4740只綿羊，構(gòu)建了針對綿羊季節(jié)繁殖性狀的大樣本參考家系。
　　2.對中國美利奴羊發(fā)情期和乏情期血清中E2、LH、P4的濃度進(jìn)行了測定。結(jié)果表明：在非繁殖季節(jié)，E2的濃度維持在較低的水平，平均濃度在9.99-12.83 pg.mL-1，低于繁殖季節(jié)發(fā)情24小時(shí)內(nèi)的18.47-19.54 pg.mL-1；在非繁殖季節(jié)，LH的

4、濃度在1.0ng/ml上下波動(dòng)，沒有發(fā)情周期中排卵峰的出現(xiàn)；非繁殖季節(jié)P4的含量保持在較低水平，平均濃度在0.25-0.29 ng/ml之間。
　　3.通過測定血清中孕酮的濃度對F2母羊在非繁殖季節(jié)的產(chǎn)羔能力進(jìn)行評估。結(jié)果表明：158只F2母羊中未檢測到孕酮周期變化個(gè)體為60只，出現(xiàn)不規(guī)律變化的個(gè)體為22只，檢測到1次和2次孕酮分泌周期變化的母羊只數(shù)分別為35和30只，檢測到3次孕酮周期變化的為11只。孕酮的周期性變化提示在非繁殖

5、季節(jié)母羊具有排卵的能力，F(xiàn)2母羊個(gè)體在非繁殖季節(jié)發(fā)情排卵方面存在差異。
　　4.從綿羊腦、卵巢EST中尋找多態(tài)的EST-SSR標(biāo)記，同時(shí)與母羊產(chǎn)羔數(shù)和初生重進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，結(jié)果表明：選擇合成的6對綿羊腦、卵巢源EST-SSR多態(tài)位點(diǎn)在供試群體中共檢測到23個(gè)等位基因，群體雜合度在0.5851-0.7766，PIC值均大于0.5屬于高度多態(tài)位點(diǎn)，其中EST622，EST463，EST561位點(diǎn)的基因型分布處于哈代溫伯格平衡狀態(tài)。與繁殖

6、性狀關(guān)聯(lián)分析表明6個(gè)EST-SSR標(biāo)記位點(diǎn)不同基因型間達(dá)到了顯著（P<0.05）或極顯著水平（P<0.01），EST418位點(diǎn)與羔羊平均初生重和總初生重關(guān)聯(lián)；EST463和EST122位點(diǎn)分別與羔羊總初生重、產(chǎn)羔數(shù)關(guān)聯(lián)；EST622和EST561位點(diǎn)與總初生重關(guān)聯(lián)；EST182位點(diǎn)與產(chǎn)羔數(shù)關(guān)聯(lián)。提示6個(gè)EST-SSR標(biāo)記位點(diǎn)可能與控制綿羊繁殖性狀的基因座緊密連鎖。
　　5.選用資源家系F2母羊158只，包括F1及親本共計(jì)460只個(gè)

7、體，選擇107個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)和2個(gè)EST-SSR位點(diǎn)，利用Crimap2.4構(gòu)建群體的遺傳連鎖圖譜。結(jié)果表明：構(gòu)建了包括1、2、4、5、6、7、8、12、13、16、19、20、25號染色體連鎖群共計(jì)13條遺傳連鎖圖譜，圖譜總長度總長度為1738.4cM；各連鎖群長度在69.9-250.4CM之間，不同連鎖群上的標(biāo)記數(shù)在5-12個(gè)。與ncbi報(bào)道的綿羊SM4.7對比，標(biāo)記間順序基本一致。
　　6.根據(jù)非繁殖季節(jié)公羊試情結(jié)果和血清中孕