影響蒙古羊雙羔群體繁殖性狀候選基因的研究.pdf

1、本研究選擇控制Booroola Merino羊多胎性能的BMPR—IB基因、以及影響Invedal和Hanna綿羊多胎性狀的BMP15基因作為多胎候選基因，旨在探索這兩個候選基因與蒙古羊雙羔群體繁殖性狀之間的關(guān)系，為開展蒙古羊高繁殖力的遺傳學(xué)基礎(chǔ)研究提供科學(xué)依據(jù)。 （1）采用聚合酶鏈式反應(yīng)—限制性片段長度多態(tài)性PCR—RFLP（Restriction Fragment Polymorphisms，RFLPs）分子標記技術(shù)，以蒙古

2、羊單羔群體（18只）、多胎類型小尾寒羊（30只）為對照組對蒙古羊雙羔群體（50只）進行了BMPR—IB基因的遺傳多態(tài)性分析。結(jié)果表明：在蒙古羊雙羔群體和蒙古羊單羔群體中都不存在Booroola Merino羊BMPR—IB基因的FecB突變，表明BMPR—IB基因不是影響蒙古羊多胎性狀的主效基因；而在多胎類型品種小尾寒羊中存在相應(yīng)的突變，發(fā)現(xiàn)了三種基因型，其突變純合子（BB），雜合子（B+）和野生型（++）的基因型頻率分別是0.100，

3、0.733和0.167，與產(chǎn)羔數(shù)關(guān)聯(lián)分析表明，BB基因型母羊和B+母羊平均產(chǎn)羔數(shù)差異極顯著（p<0.01），推斷BHPR—IB基因是控制小尾寒羊多胎性能的主效基因。經(jīng)χ2適合性檢驗表明，小尾寒羊該基因位點顯著偏離Hardy—Weinberg平衡（P<0.05）。 （2）采用PCR—RFLP技術(shù)對BMP15的FecX1位點突變進行多態(tài)性分析表明：蒙古羊雙羔群體、蒙古羊單羔群體以及多胎類型小尾寒羊群體中均不存在該位點的突變。即BMP

4、15的FecX1位點不是影響蒙古羊和小尾寒羊多胎性狀的主效基因。 （3）采用單核苷酸多態(tài)性標記PCR—SSCP技術(shù)對BMP15的B1位點進行多態(tài)性分析，結(jié)果表明：在三種群體中存在相應(yīng)的突變28—30bp（CTT缺失）并發(fā)現(xiàn)了三種基因型，蒙古羊雙羔群體三種基因型頻率分別是0.020（++），0.940（B+）和0.040（BB）；蒙古羊單羔群體只檢測到了兩種基因型，基因型頻率分別是0.722（++）和0.278（BB）：小尾寒羊群

5、體中三種基因型頻率分別是0.300（++），0.667（B+）和0.033（BB））。B+基因型蒙古羊平均產(chǎn)羔數(shù)比BB基因型多0.83只，差異極顯著（P<0.01），推斷BMP15的B1突變有可能是控制蒙古羊多胎性能的主效基因；小尾寒羊群體中三種基因型母羊平均產(chǎn)羔數(shù)差異不顯著（p>0.05）。經(jīng)χ2適合性檢驗表明，蒙古羊雙羔群體該位點顯著偏離Hardy—Weinberg平衡狀態(tài)（P<0.01）；蒙古羊單羔群體及小尾寒羊該位點處于Hard

6、y—Weinberg平衡（P>0.05）． （4）采用單核苷酸多態(tài)性標記PCR—SSCP（Single Nucleotide Polymorphisms，SNPs）技術(shù)對BMP15的B4位點進行多態(tài)性分析，結(jié)果表明：在蒙古羊單、雙羔群體以及小尾寒羊中均沒有發(fā)現(xiàn)B4位點1100bp處的（T→G）堿基突變，但是在1000bp處發(fā)現(xiàn)了A堿基的缺失和1032bp處發(fā)現(xiàn)了C堿基插入。蒙古羊雙羔群體三種基因型頻率分別是0.220（++），0

7、.420（B+）和0.360（BB）：蒙古羊單羔群體分別是1.000（++）．0.000（B+）和0.000（BB）；小尾寒羊群體是0.800（++），0.000（B+）和0.200（BB）。與產(chǎn)羔數(shù)關(guān)聯(lián)分析表明，蒙古羊群體中B+基因型母羊和++基因型母羊平均產(chǎn)羔數(shù)差異顯著（p<0.05）；小尾寒羊群體中母羊平均產(chǎn)羔數(shù)差異不顯著。經(jīng)χ2適合性檢驗表明，蒙古羊單、雙羔群體以及小尾寒羊中的值都未達到顯著水平，即均處于Hardy—Weinbe