2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、大黃魚營養(yǎng)豐富、水分含量高及pH值偏高,在捕撈后貯運過程中極其容易腐敗。研究表明,微生物是引起水產(chǎn)品腐敗變質(zhì)的重要原因之一,其中溫帶水域捕撈的水產(chǎn)品的特定腐敗菌(special spoilagebacterial,SSO)多為希瓦氏菌屬(Shewanella)或假單胞菌屬(Pseudomonas)。目前,在SSO的研究主要集中在鑒定和貨架期的預(yù)測方面,而在SSO腐敗能力的差異機制方面研究較少。鑒于此,本研究采用生化與16S rRNA方法

2、鑒定大黃魚特定腐敗菌,篩選腐敗能力差異的希瓦氏菌,從氧化三甲胺還原酶基因簇角度初步研究希瓦氏菌腐敗能力差異。
  1、采用生化和16S rRNA鑒定冷藏大黃魚貨架期終點的產(chǎn)H2S分離株菌,在滅菌魚汁和無菌魚塊分析致腐差異的希瓦氏菌。22株產(chǎn)H2S菌均為希瓦氏菌屬,其中S.baltica占59.4%,為S.putrefaciens占36.1%,S.hafniensis占4.5%。希瓦氏菌在滅菌魚汁中致腐能力存在顯著差異,其中S.ba

3、lticaXH2和XH8的缺點評分和TVB-N最高,S.putrefaciensXH14和S.baltica XH17菌最低。接種無菌魚塊的4株希瓦氏菌中XH2的樣品在72h出現(xiàn)腐敗氣味,48h細(xì)菌高于107cfu/g,產(chǎn)生較高的TMA、TVB-N、尸胺和腐胺,XH8菌次之,XH14和XH17菌最慢。
  2、四株希瓦氏菌的最適溫度為25℃,鹽濃度0.3%生長良好,鹽濃度3%生長緩慢,具有一定的耐鹽性。XH2比XH17的TMAO的

4、還原能力多0.174μg/100mL,生物被膜的形成能力高41%,胞外蛋白酶活性高13.7%,XH2的AI-2活性是XH17的27.5倍,DKPs信號分子的含量是XH17的2.2倍。結(jié)果表明,希瓦氏菌腐敗能力與TMAO還原能力、生物被膜形成、胞外蛋白酶活性有關(guān),群體感應(yīng)可能參與調(diào)控其腐敗能力。
  3、四株希瓦氏菌都擴增出2490bp的編碼TMAO還原酶的torA基因,序列同源性98%,且torA基因的表達量與致腐能力正相關(guān),S.

5、baltica XH2表達量最高。預(yù)測的四株菌TorA蛋白為分泌蛋白,4個蛋白在理論等電點、不穩(wěn)定指數(shù)、總平均疏水性、氨基酸含量等理化性質(zhì)上有差異,其高級結(jié)構(gòu)相似。其中S.balticaXH2的分子量和不穩(wěn)定指數(shù)最大,理論等電點和總平均疏水性最小。研究進一步擴增分析了S.baltica XH2和S.baltica XH17的TMAO還原酶基因簇序列。在S.baltica XH2擴增出了4條明亮的條帶,經(jīng)PCR擴增測序和拼接后,獲得了97

6、11bp的TMAO還原酶基因簇全長序列。生物信息學(xué)分析顯示,該序列包括TMAO還原酶的操作子torECAD及調(diào)控系統(tǒng)torRTS的7個ORF,分別為torE,torC,torA,torD,torS,torT和torR,其功能分別為硝酸鹽還原酶、C型細(xì)胞色素、TMAO還原酶、伴侶蛋白、傳感器、細(xì)菌周質(zhì)蛋白、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)器。通過BLASTn比較發(fā)現(xiàn),該序列與S.baltica OS185的TMAO還原酶基因簇有很高的相似性,分別為93%、99%

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