凝結芽孢桿菌抑菌物質分離鑒定及其對大黃魚保鮮效果的研究.pdf

1、養(yǎng)殖大黃魚魚肉營養(yǎng)豐富，成為大眾膳食結構中重要的一環(huán)。也正因為它所含的蛋白質含量較高，故極易受到自身蛋白酶和腐敗菌的雙重作用，致使其在儲藏過程中產生降解與變性，最后導致魚肉營養(yǎng)成分流失、感官特性變差及新鮮度降低，嚴重損壞了大黃魚的經濟價值。
　　本研究基于天然生物防腐保鮮劑的在實際應用中的優(yōu)勢，針對我實驗室自行分離得到的益生菌Bacillus coagulans LL1103，研究了其胞外抑菌物質的理化特性并對抑菌物質進行了分離純

2、化和初步鑒定，最后將分離純化出來的細菌素Lactocin LL1103的粗提液應用到了大黃魚保鮮當中，相關結論如下:
　　1、以凝結芽孢桿菌Bacillus coagulans LL1103為研究對象，研究了其生長情況與pH值及抑菌能力的關系，發(fā)現其最佳抑菌發(fā)酵時間為18h。制備了其抑菌產物粗品并測定其抑菌譜，結果表明，抑菌產物對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有明顯的抑菌效果，具有廣譜抗菌性。隨后對抑菌產物粗品的理化性質進行了研究，

3、發(fā)現它在MRS培養(yǎng)基中培養(yǎng)后，最適溫度37℃，最適pH=6.0下具有最強的抑菌活性。
　　2、展開了抑菌物質的初步鑒定，在排除酸性末端產物和菌體的干擾后，用蛋白酶K等多種蛋白酶和過氧化氫酶去處理抑菌產物粗品，發(fā)現其對蛋白酶K、胰蛋白酶、胃蛋白酶較敏感，對氧化氫酶不敏感，初步推斷抑菌物質的主要成分是對蛋白酶敏感的細菌素類物質。
　　3、對凝結芽孢桿菌抑菌物質粗品采用硫酸銨分級沉淀法進行細菌素Lactocin LL1103的粗提

4、，細菌素粗品經Tricine-SDS-PAGE蛋白電泳和活性測定后確定其分子量在2.4kDa上下;后對其進行凝膠過濾和色譜精制，最后得到了Lactocin LL1103純品，并進行N-端氨基酸測序，獲得序列為:GEPGPAGAVGPAGKQGPPGPQGPTGPP。
　　4、采用了不同濃度的Lactocin LL1103粗提物進行大黃魚冷藏保鮮試驗，測定了TVB-N、TBA、K值、感官指標、pH值、微生物指標這幾個保鮮指標，發(fā)現各