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1、目的:采用體內(nèi)篩選的方法建立人肺癌小鼠高轉(zhuǎn)移模型,同時(shí)建立高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系,觀察相關(guān)的生物學(xué)特性,探討轉(zhuǎn)移相關(guān)差異基因表達(dá),為肺癌的機(jī)理研究、診斷和防治等提供理想的動(dòng)物模型。 方法:1、切除首代移植瘤,延長(zhǎng)動(dòng)物生存時(shí)間而獲得轉(zhuǎn)移灶,從第二代起采用肺轉(zhuǎn)移灶→皮下移植→肺轉(zhuǎn)移灶→皮下移植的體內(nèi)循環(huán)篩選方法建立NOD/SCID小鼠人肺癌細(xì)胞SPC-A-1皮下移植瘤高轉(zhuǎn)移模型,并進(jìn)行腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移情況,組織病理學(xué)和超微結(jié)構(gòu)觀察。2、利用篩
2、選的高轉(zhuǎn)移模型建立相應(yīng)的高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系,進(jìn)行各種相關(guān)生物學(xué)特性觀察;3、采用cDNA芯片技術(shù)對(duì)比分析篩選前、后腫瘤細(xì)胞中差異表達(dá)基因。 結(jié)果:1、第一代移植瘤切除后轉(zhuǎn)移率達(dá)66.7%,通過4代體內(nèi)反復(fù)篩選建立了100%肺轉(zhuǎn)移NOD/SCID小鼠模型。2、建立了相應(yīng)的高轉(zhuǎn)移細(xì)胞系SPG-A-1sci,細(xì)胞生長(zhǎng)行為、染色體分析和體外侵襲實(shí)驗(yàn)等生物學(xué)特性觀察表明該細(xì)胞系保持了原有的人肺腺癌的生物學(xué)特性.3、基因芯片篩選獲得7649條差異
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