2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  腦膜癌?。↙eptomeningeal carcinomatosis,LC)是原發(fā)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移,局灶或彌漫浸潤軟腦膜及蛛網(wǎng)膜下腔,并播散至腦脊液,是惡性腫瘤中樞神經(jīng)系統(tǒng)轉(zhuǎn)移的一種較少見類型,原發(fā)病灶常為肺癌,腺癌是常見的組織學(xué)類型。近年來,腦膜癌病的發(fā)病率呈上升趨勢,而目前該病的治療效果尚不理想,尚缺乏針對原發(fā)腫瘤不同來源及病理特征的有效治療手段。為進(jìn)一步探索相關(guān)治療靶點,以及評估相關(guān)治療藥物及方法的有效性及安全性,首

2、先需要建立穩(wěn)定的實驗動物模型。目前腦膜癌病動物模型的研究報道較少,國外研究者較早通過小腦延髓池(Cisterna magna,CM)穿刺進(jìn)行的腦膜癌病大鼠模型的實驗性研究及鞘內(nèi)給藥方式需要較復(fù)雜的操作過程。本實驗通過對早期腦膜癌病動物模型的實驗方法進(jìn)行改進(jìn),旨在建立操作簡單、重復(fù)性較好的腦膜癌病小鼠模型,并進(jìn)一步探討模型小鼠腦膜腫瘤中血小板-內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子(Platelet endothelial cell adhesion mole

3、cule-1,CD31)的表達(dá)情況。
  方法:
  1小鼠小腦延髓池注射法
  雌性6-8周齡C57BL/6小鼠35只,其中20只隨機(jī)分為對照組和實驗組,每組10只,分別經(jīng)小腦延髓池穿刺注射PBS或Lewis肺癌細(xì)胞(Lewis Lung carcinoma cell,LLC)懸液(1.5×105個細(xì)胞)7.5μl,觀察評估小腦延髓池注射后兩組小鼠體重隨時間變化及神經(jīng)系統(tǒng)癥狀表現(xiàn);15只隨機(jī)分為正常對照組(n=3)、

4、PBS組(n=6)和模型組(n=6),當(dāng)小鼠癥狀表現(xiàn)明顯時,4%多聚甲醛灌流固定取材,小鼠腦和脊髓組織用于組織病理學(xué)蘇木精-伊紅染色(hematoxylin-eosin staining,HE)及免疫組化分析。
  2石蠟切片HE染色法
  4%多聚甲醛固定后的小鼠腦和脊髓組織標(biāo)本經(jīng)脫水、透明、浸蠟、包埋后制成蠟塊,用Leica RM2235石蠟切片機(jī)切片,切片厚度為5μm。切片經(jīng)脫蠟后進(jìn)行常規(guī)HE染色,組織病理學(xué)觀察軟腦(

5、脊)膜病理改變。
  3免疫組織化學(xué)法
  采用免疫組化方法對模型組及PBS組小鼠橋腦部位的軟腦膜進(jìn)行 CD31染色分析,評估腦膜癌病血管生成。
  結(jié)果:
  1小鼠經(jīng)小腦延髓池緩慢注射10μl稀釋的墨汁溶液后,解剖小鼠腦及脊髓,可見墨汁溶液主要分布于小腦延髓池、腹側(cè)腦池。
  2小腦延髓池注射LLC細(xì)胞或PBS后兩組小鼠行為學(xué)觀察
  (1)小腦延髓池注射前對照組小鼠體重為(18.68±1.08)

6、g,實驗組小鼠體重為(19.43±0.86)g,兩組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.101)。小腦延髓池注射PBS或LLC細(xì)胞懸液后第1天,兩組小鼠體重均下降明顯,對照組小鼠體重為(17.02±1.63)g,實驗組小鼠體重為(17.08±1.06)g,兩組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.921)。第2~3天,兩組小鼠體重水平仍較低,較前變化不大。第4~10天,兩組小鼠體重均緩慢回升,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P﹥0.05)。第11天開始,對照組小鼠

7、體重仍在逐漸增加,而實驗組小鼠體重開始進(jìn)行性下降直至死亡,兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.029)。實驗組小鼠均在40天內(nèi)死亡,中位生存時間為32.5天,而對照組小鼠均至觀察終點40天仍存活,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P﹤0.0001)。
 ?。?)實驗組小鼠小腦延髓池注射LLC細(xì)胞后癥狀出現(xiàn)在第10~16天,平均為(13±2)天。全部實驗組(n=10)小鼠均表現(xiàn)為活動明顯減少,全身狀態(tài)差(10/10);其中6只小鼠病程中出現(xiàn)了弓背姿

8、勢(6/10);5只小鼠出現(xiàn)步態(tài)不穩(wěn)(5/10);2只小鼠出現(xiàn)拎起尾巴旋轉(zhuǎn)的表現(xiàn)(2/10)。而對照組小鼠均活動正常,未出現(xiàn)上述異常表現(xiàn)。
  3蘇木精-伊紅染色顯示模型組小鼠癥狀表現(xiàn)明顯時其腦與脊髓軟膜組織病理可見腫瘤細(xì)胞浸潤,以腦基底部及脊髓頸段多見。
  4免疫組化結(jié)果顯示CD31在模型組及PBS組小鼠橋腦部位軟腦膜的表達(dá)明顯不同,實驗組血管計數(shù)約為(12.83±3.01)mm-1,對照組為(6.08±1.02)mm-

9、1,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.021)。
  結(jié)論:
  1通過小腦延髓池注射Lewis肺癌細(xì)胞可成功建立肺癌腦膜癌病小鼠模型,實驗方法簡單、重復(fù)性較好。
  2腦膜癌病模型小鼠病程中可出現(xiàn)體重進(jìn)行性下降、活動明顯較少、全身狀態(tài)差、弓背姿勢、步態(tài)不穩(wěn)、拎起尾巴時旋轉(zhuǎn)等異常癥狀表現(xiàn),但各小鼠表現(xiàn)不盡相同。
  3腦膜癌病模型小鼠的軟腦膜部位CD31的表達(dá)明顯增多,表明腦膜血管密度增多,提示新生微血管形成可能在腦膜

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