外周血間充質(zhì)干細(xì)胞影響腱-骨界面愈合的初步觀察.pdf

1、目的：探討兔自體Mscs對(duì)ACL重建術(shù)后腱-骨界面愈合的形態(tài)學(xué)影響
　　方法：8只4～6月齡新西蘭白兔按1-8編號(hào),隨機(jī)均分為A、B二組。粒細(xì)胞刺激因子動(dòng)員各組兔后,抽取外周血分離、純化培養(yǎng)干細(xì)胞。隨機(jī)選取兔一側(cè)膝關(guān)節(jié)為研究對(duì)象,趾長(zhǎng)屈肌作為ACL移植物。A組,將間充質(zhì)干細(xì)胞凝膠注入ACL重建模型股骨道頂端間隙;B組不注射任何試劑。于2周、4周、8周、12周4個(gè)時(shí)間點(diǎn)每組各處死1只兔行形態(tài)學(xué)觀察,包括解剖形態(tài)學(xué)、光鏡形態(tài)學(xué)觀察。光

2、鏡觀察,即標(biāo)本石蠟切片分別行蘇木素伊紅染色即HE染色、甲苯胺藍(lán)染色即TB染色、Masson三色染色后進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)觀察,最終比較各組前交叉韌帶重建術(shù)后腱-骨界面愈合情況。
　　結(jié)果：(1)光鏡:①A組:術(shù)后2周移植肌腱與骨隧道界面連接疏松,界面區(qū)主要由新生肉芽組織填充,但可見排列不規(guī)整類軟骨細(xì)胞;術(shù)后4周腱-骨界面連接緊密,界限間隙不易辨認(rèn),成纖維細(xì)胞增生及膠原纖維合成增多,類軟骨細(xì)胞增多,但排列仍不規(guī)整,可見新生骨質(zhì)向肌腱長(zhǎng)入,

3、出現(xiàn)軟骨化骨過(guò)程;術(shù)后8周腱-骨界面連接緊密,成纖維細(xì)胞大量增生,膠原纖維合成增多,類軟骨細(xì)胞增多,較為成熟,排列較為規(guī)整,并出現(xiàn) Sharpey纖維及軟骨移行帶;術(shù)后12周腱-骨界面連接緊密,界面區(qū)可見大量排列有序的Sharpey纖維及規(guī)整排列的軟骨細(xì)胞。②B組:術(shù)后2周腱-骨界面連接疏松,界限清晰可辨,界面區(qū)主要由新生肉芽組織填充;術(shù)后4周腱-骨連接相對(duì)較為緊密,但無(wú)明顯腱-骨連接,成纖維細(xì)胞增多并可見排列不規(guī)整的類軟骨細(xì)胞;術(shù)后8

4、周腱-骨結(jié)合緊密,界限間隙不易辨認(rèn),成纖維細(xì)胞增生,膠原纖維合成增多,但排列不太規(guī)整;術(shù)后12周腱-骨界面類軟骨細(xì)胞增多,但仍排列不太規(guī)整,出現(xiàn) Sharpey纖維,但連接組織中膠原排列紊亂。
　　(2)術(shù)后4個(gè)時(shí)間點(diǎn)對(duì)二組標(biāo)本進(jìn)行HE染色高倍鏡下成纖維細(xì)胞計(jì)數(shù),采用單向方差分析及SNK法檢驗(yàn),得出結(jié)論:A組與B組和在四個(gè)時(shí)間點(diǎn)比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論：間充質(zhì)干細(xì)胞能促進(jìn)有前交叉韌帶重建術(shù)后腱-骨界面的