過表達(dá)Twist基因誘導(dǎo)肺腺癌NCI-H1299細(xì)胞EMT及其對(duì)增殖、遷移及侵襲能力的影響.pdf

1、復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文後大學(xué)博士學(xué)位論文學(xué)校代碼：10246學(xué)號(hào)：0556223過表達(dá)Twist基因誘導(dǎo)肺腺癌NCIH1299細(xì)胞EMT及其對(duì)增殖、遷移及侵襲能力的影響^●^m●一^一‘●tUVerexpressIonorlwlStbeneslnduclngLUngAdenocarcino腿NCIH1299cellsEMTandtheImpactonProliferation，MigrationandInvasion院系：上海醫(yī)學(xué)院專業(yè)：

2、臨床醫(yī)學(xué)(八年制)姓名：沈嘯指導(dǎo)教師：王群主任醫(yī)師導(dǎo)師組成員：蔣偉副主任醫(yī)師逢旭光主治醫(yī)師完成日期：2013年4月10日曰一復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文過表達(dá)Twist基因誘導(dǎo)肺腺癌NCIH1299細(xì)胞眥及其對(duì)增殖、遷移及侵襲能力的影響中文摘要目的：上皮一間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial—mesenchymaltransitions，EMT)是指上皮細(xì)胞在一些因素的作用下，失去極性及細(xì)胞間緊密連接和黏附連接，獲得了浸潤性和游走遷移能力，變成具備間

3、質(zhì)細(xì)胞形態(tài)和特性的細(xì)胞。上皮表型的喪失和間質(zhì)特性的獲得是EMT發(fā)生的主要特征，這種表型的轉(zhuǎn)化使腫瘤細(xì)胞擺脫細(xì)胞間黏附，從而表現(xiàn)得更具侵襲和轉(zhuǎn)移能力。Twist最初被認(rèn)為是一種在胚胎發(fā)育中起關(guān)鍵調(diào)控作用的轉(zhuǎn)錄因子，廣泛參與調(diào)控器官生長發(fā)育、腫瘤發(fā)生、細(xì)胞增殖分化等過程，其表達(dá)上調(diào)可能促進(jìn)細(xì)胞表型向惡性轉(zhuǎn)化，可能是某些惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展的關(guān)鍵因素。。Twist能夠直接誘導(dǎo)EMT，并能間接地影響其他的EMT轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子。本實(shí)驗(yàn)通過上調(diào)Twis

4、t基因，誘導(dǎo)人肺腺癌NCI—H1299細(xì)胞發(fā)生EMT，并觀察其對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖、遷移及侵襲能力的影響。方法：通過攜帶有Twistl基因的腺病毒液和陰性病毒液分別感染人肺腺癌NCI—H1299細(xì)胞，分為感染組、對(duì)照組和空白對(duì)照組，觀察其形態(tài)學(xué)改變；qPCR檢測5個(gè)目的基因：Twistl、E—cadherin、N—cadherin、Vimentin和Fibronectin的表達(dá)情況；WesternBlot檢測5個(gè)蛋白：Twistl、Ecadh

5、erin、Ncadherin、Vimentin和Fibronectin的表達(dá)情況；然后以CCK8實(shí)驗(yàn)繪制細(xì)胞生長曲線，細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)觀察其遷移能力，TranswelI實(shí)驗(yàn)檢測其侵襲能力。結(jié)果：1攜帶有Twistl基因的腺病毒液成功感染NCIH1299細(xì)胞。2感染后qPCR檢測，感染組Twistl、Ncadherin、Vimentin和Fibronectin的表達(dá)高于對(duì)照組，Ecadherin表達(dá)與對(duì)照組無明顯區(qū)別。3感染后WesternB