Hemin誘導(dǎo)腦紅蛋白高表達(dá)對(duì)脊髓損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的:制作大鼠Allen's脊髓損傷(Spinal Cord Injury，SCI)模型，腹腔注射氯化血紅素(Hemin)溶液。分析Hemin干預(yù)脊髓損傷后大鼠行為學(xué)評(píng)分的變化和不同分組實(shí)驗(yàn)后一定時(shí)間點(diǎn)評(píng)分的差異，Hemin處理后大鼠脊髓內(nèi)腦紅蛋白(Neuroglobin，Ngb)表達(dá)空間和數(shù)量的規(guī)律，以及Hemin處理引起的脊髓Ngb高表達(dá)對(duì)于脊髓損傷后脊髓組織結(jié)構(gòu)、細(xì)胞水平、病理進(jìn)程影響，試為臨床采用Hemin干預(yù)脊髓損傷提供可靠的

2、實(shí)驗(yàn)室理論基礎(chǔ)。
　　方法:健康雄性SD大鼠90只，體重180g-200g，由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院提供，隨機(jī)分為三組:對(duì)照組（假手術(shù)組）、手術(shù)組（僅造模）、Hemin處理組（造模后腹腔注射Hemin溶液）。假手術(shù)組僅進(jìn)行椎板卸下后還納，不進(jìn)行脊髓打擊，造模后腹腔注射相同量生理鹽水;手術(shù)組采用Allen's法制作大鼠損傷模型，造模后腹腔注射相同量生理鹽水;Hemin處理組進(jìn)行造模和相同量的Hemin溶液腹腔注射。采用大鼠后肢功能BBB評(píng)分

3、、蘇木素伊紅染色、尼氏染色、免疫組化等方法評(píng)價(jià)各組大鼠實(shí)驗(yàn)后1d、3d、7d、14d、28d、56d時(shí)大鼠運(yùn)動(dòng)功能差異、脊髓結(jié)構(gòu)改變、Ngb表達(dá)含量和分布的差異等。實(shí)驗(yàn)相關(guān)結(jié)果數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果:(1) BBB評(píng)分結(jié)果:對(duì)照組＞Hemin處理組＞手術(shù)組。(2) HE染色結(jié)果:對(duì)照組脊髓組織完整，無(wú)明顯的紅細(xì)胞積聚及空隙，無(wú)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，神經(jīng)細(xì)胞未出現(xiàn)病理改變;手術(shù)組脊髓具有明顯的紅細(xì)胞積聚及空隙，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯，噬神

4、經(jīng)現(xiàn)象等病理改變嚴(yán)重;Hemin處理組損傷重于對(duì)照組，但明顯輕于手術(shù)組，有少量出血和空腔，神經(jīng)組織炎性細(xì)胞浸潤(rùn)現(xiàn)象較少，神經(jīng)細(xì)胞水腫變性較少。(3)尼氏染色結(jié)果:對(duì)照組神經(jīng)元形態(tài)正常，尼氏體圍繞胞核呈顆粒狀，顏色較深切且分布較多，由內(nèi)向外顏色逐漸遞減;Hemin處理組染色結(jié)果中水腫及顏色變淺、數(shù)量減少重于對(duì)照組但輕于手術(shù)組;手術(shù)組神經(jīng)元病理變化最重，除上述情況外，更有尼氏體溶解的現(xiàn)象。(4)免疫組化結(jié)果:Hemin處理組陽(yáng)性細(xì)胞最多，手

5、術(shù)組次之，假手術(shù)組最少。
　　結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)采用Hemin腹腔注射干預(yù)脊髓損傷Allen's造模后的SD大鼠，對(duì)脊髓損傷引起脊髓組織Ngb高表達(dá)及Hemin誘導(dǎo)脊髓組織Ngb高表達(dá)的作用進(jìn)行了驗(yàn)證。對(duì)Hemin誘導(dǎo)的脊髓組織Ngb高表達(dá)在脊髓損傷過(guò)程中的作用進(jìn)行了研究和探討。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果提示利用Hemin誘導(dǎo)脊髓Ngb高表達(dá)可以在提高大鼠對(duì)脊髓損傷的抗性。Ngb的神經(jīng)保護(hù)作用涉及多途徑、多環(huán)節(jié)，利用Hemin可以增強(qiáng)內(nèi)源性Ngb