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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
缺氧狀態(tài)下檢測(cè)宮頸癌Siha細(xì)胞增殖和遷移能力,并且觀察缺氧誘導(dǎo)因子-1α與Hedgehog信號(hào)傳導(dǎo)通路關(guān)鍵因子Gli-1及Smo在宮頸癌Siha細(xì)胞中的表達(dá)。
方法:
采用MTT法和劃痕實(shí)驗(yàn),檢測(cè)發(fā)生缺氧后的宮頸癌Siha細(xì)胞的體外增殖能力和細(xì)胞遷移能力。用RT-PCR和Western-Blot方法檢測(cè)宮頸癌Siha細(xì)胞發(fā)生缺氧后,細(xì)胞對(duì)Gli-1和Smo基因mRNA及蛋白的表達(dá)。
結(jié)果
2、:
Siha細(xì)胞在常氧狀態(tài)下劃痕距離隨著時(shí)間的增加逐漸減小。而在缺氧組,劃痕間距隨著時(shí)間的延長(zhǎng)顯著減小,劃痕愈合速度比對(duì)照組快。RT-PCR和Western-Blot結(jié)果顯示,分別加入不同時(shí)間(24h和48h)的氯化鈷(CoCl2)作用于宮頸癌Siha細(xì)胞,缺氧24h和48h后Siha細(xì)胞中HIF-1α基因和蛋白的表達(dá)水平明顯上升(P<0.05)。各時(shí)間段(24小時(shí),48小時(shí))缺氧組細(xì)胞Gli-1的基因和蛋白的表達(dá)水平明顯高于
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