肝硬化患者外周血CXCR1、CXCR2及其配體IL-8表達.pdf

1、目的：研究肝硬化患者外周血、肝活檢組織CXCR1、CXCR2及其共同配體IL-8的表達，并進一步檢測CXCR1、CXCR2及IL-8mRNA含量，分析其與病毒載量、轉氨酶水平的相互關系，探討CXCR1、CXCR2與IL-8在肝硬化致病分子機制中的作用。
　　 方法：篩選典型HBV感染后肝硬化患者65例，以ELISA法檢測患者血清IL-8蛋白水平;Real-timePCR檢測PBMC及肝活檢組織中CXCR1、CXCR2及IL-8m

2、RNA含量，以lgcDNA/lgGAPDH代表其最終mRNA水平。采用SP免疫組化法觀察肝活檢組織CXCR1、CXCR2及其配體IL-8的表達。
　　 結果：肝硬化患者血清IL-8水平為(448.41±59.46)pg/ml，較正常組顯著增高，差異有顯著性(P＜0.01);PBMCs內(nèi)CXCR1及IL-8mRNA表達量分別為(0.6925±0.1354)、(1.4850±0.1801)logcDNA/logGAPDH，而CXCR

3、2mRNA表達量為(0.4344±0.0694)logcDNA/logGAPDH，較正常組略有下降，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。其中，肝硬化失代償期患者血清IL-8水平為(488.19±49.44)pg/ml，較肝硬化代償期顯著增高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，PBMCs內(nèi)CXCR1及IL-8mRNA水平為(0.7662±0.1292)、(1.5453±0.1783)logcDNA/logGAPDH,CXCR2mRNA表達

4、量為(0.4279±0.0732)logcDNA/logGAPDH，較正常組略有下降，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);肝硬化病毒復制組CXCR1及IL-8mRNA水平為(0.7498±0.1106)、(1.5676±0.1558)logcDNA/logGAPDH，血清IL-8水平為(472.21±52.44)pg/ml，較非復制組顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01);17例肝硬化代償期患者IFN治療前PBMCs及血清病毒載量分

5、別為10(5.07±0.80)copies/ml、10(5.93±0.78)copies/ml,ALT、AST水平為(84.41±30.65)U/L、(72.29±35.69)U/L，血清IL-8水平為(440.58±36.63)pg/ml，CXCRl、CXCR2及IL-8mRNA表達量分別為(0.7089±0.0713)、(0.4532±0.0527)、(1.5243±0.1541)logcDNA/logGAPDH。IFN治療3個月后

6、PBMCs及血清病毒載量分別為10(4.58±0.87)copies/ml、10(5.18±0.81)copies/ml，ALT、AST水平分別為(96.71±25.41)U/L、(84.76±26.76)U/L，較治療前升高:血清IL-8水平為(395.99±32.56)pg/ml，較治療前明顯下降，差異有顯著性(P＜0.01)，CXCR1、CXCR2及IL-8mRNA表達量分別為(0.6557±0.0916)、(0.4293±0.0

7、634)、(1.4745±0.1398)logcDNA/logGAPDH，均較治療前雖有下降，但差異無顯著性(P＞0.05)。IFN治療6個月后PBMCs及血清病毒載量分別為10(2.91±0.75)copies/ml、10(3.08±0.76)copies/ml，ALT、AST水平分別為(62.06±17.75)U/L、(53.94±22.00)U/L，血清IL-8水平為(281.93±33.83)pg/ml，CXCR1、CXCR2及

8、IL-8mRNA表達量分別為(0.5203±0.0876)、(0.4122±0.0557)、（1.3802±0.1320）logcDNA/logGAPDH，與治療前比較，病毒載量、ALT、AST、血清IL-8水平、CXCR1及IL-8mRNA表達均明顯下降，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05，P＜0.01)。IFN治療12個月后PBMCs及血清病毒載量分別為10(2.29±0.86)copies/ml、10(2.11±0.67)copies

9、/ml，ALT、AST水平分別為（38.82±11.81）、（36.53±12.58）U/L，CXCR1、CXCR2及IL-8mRNA表達量為(0.4246±0.0799)、(0.4034±0.0522)、（1.2436±0.1253）logcDNA/logGAPDH，血清IL-8水平為（188.11±31.78）pg/ml，與治療前相比，HBV-DNA、ALT、AST、CXCR1、IL-8mRNA表達量及血清IL-8水平均明顯下降，差

10、異有統(tǒng)計學意義(p＜0.01)。肝硬化PBMCs內(nèi)CXCR1mRNA、IL-8mRNA與HBV-DNA(r=0.380,0.454,P＜0.05)、ALT(r＝0.687,0.612,P＜0.01)及AST顯著相關(r=0.601，0.579，P＜0.01);CXCR2mRNA與HBV-DNA(r＝0.198，P＞0.05)、ALT(r＝0.143，P＞0.05)及AST無相關性(r=0.196，P＞0.05);17例肝硬化代償期患者I

11、FN治療前CXCR1及IL-8與ALT(r=0.530，0.578，P＜0.05)、AST(r=0.511，0.501，P＜0.05)明顯相關，隨著IFN治療時間延長，ALT、AST逐漸恢復，CXCR1、IL-8水平亦明顯下降。SP免疫組化染色顯示CXCR1及其配體IL-8在肝硬化患者肝活檢組織中表達明顯增強，與正常對照比較，差異有顯著性(P＜0.01);CXCR2在肝硬化患者肝活檢組織中表達微弱，與正常對照比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞

12、0.05);CXCR1、CXCR2及IL-8均呈彌漫性表達于肝細胞、浸潤的炎癥細胞、血管內(nèi)皮細胞等胞漿。
　　 結論：肝硬化患者外周血及肝活檢組織CXCR1、IL-8mRNA及其蛋白表達升高，其表達水平與血清HBV-DNA復制水平、ALT、AST水平呈正相關，而CXCR2及其mRNA表達變化不明顯，提示CXCR1及IL-8與肝硬化的發(fā)生、發(fā)展有關，參與肝硬化疾病進展。CXCR2的作用相對較弱。IFN具有明顯的抗病毒和免疫調節(jié)雙向