慢性乙肝患者PMNs內(nèi)CXCL8及其受體CXCR1、CXCR2的表達(dá).pdf

1、目的:探討慢性乙肝患者外周血CXCL8含量及中性粒細(xì)胞CXCL8、CXCR1、CXCR2的表達(dá)水平。觀察HBV侵染中性粒細(xì)胞后對(duì)CXCL8及其受體CXCR1、CXCR2表達(dá)的影響。
　　方法:篩選慢性乙肝患者42例，其中HBeAg陽(yáng)性、陰性患者分別為17和25例，HBV-DNA陽(yáng)性和陰性患者分別為13例和29例，以ELISA法檢測(cè)患者血清CXCL8水平，Trizol提取PMNs總RNA．并逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，qPCR法檢測(cè)慢性乙肝P

2、MNs內(nèi)CXCL8、CXCR1、CXCR2 mRNA表達(dá)量，以IgcDNA/lgGAPDH代表其最終mRNA水平。進(jìn)一步觀察血清CXCL8含量及PMNs內(nèi)CXCL8、CXCR1、CXCR2mRNA表達(dá)水平與血清ALT水平的相互關(guān)系。采用SABC細(xì)胞免疫化學(xué)染色法觀察患者外周血PMNs內(nèi)CXCL8、CXCR1、CXCR2的表達(dá)，對(duì)比觀察HBV侵染PMNs后對(duì)CXCL8、CXCR1、CXCR2表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:慢性乙肝患者血清C

3、XCL8含量為(432.43±216.33) pg/mL。其中．HBeAg(+)與HBeAg（-）患者CXCL8含量分別為(612.15±165.56) pg/mL和(310.21±152.42) pg/mL，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。HBV-DNA(+)與HBV-DNA（-）患者CXCL8含量分別為(593.74±174.03) pg/mL和(360.11±195.05) pg/mL,差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。患者外

4、周血PMNs內(nèi)CXCL8、CXCR1的mRNA水平分別為1.12±0.21、0.86±0.37，較正常對(duì)照組明顯升高(P＜0.01)。其中HBeA9(+)患者CXCL8、CXCR1的mRNA水平分別為1.54±0.30、1.01±0.34，與HBeAg(-)組對(duì)照組相比，差異有顯著性（P＜0.05）;HBeAg(+)患者CXCR2的mRNA水平為1.21±0.15，與HBeAg(-)患者1.13±0.32相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.

5、05)。HBV-DNA(+)組與HBV-DNA(-)組相比，CXCL8、CXCR1的mRNA水平分別為1.22±0.26、1.05±0.21與1.08±0.18、0.79±0.42，差異有顯著性(P＜0.05);CXCR2的mRNA水平分別為1.13±0.25和1.17±0.29，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。血清CXCL8水平與ALT異常升高呈正相關(guān)(r=0.859，P＜0.01)，PMNs內(nèi)CXCL8、CXCR1的mRNA與AL

6、T異常升高亦有一定相關(guān)性(r=0.688．P＜0.01;r=0.585，P＜0.01)，而CX CR2表達(dá)與ALT異常升高無(wú)明顯相關(guān)性(r=0.088，P＞0.05)。SABC免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果顯示，CXCL8主要位于PMNs胞漿中，CXCR1、CXCR2多見(jiàn)于胞漿和胞膜上。其中HBeAg(+)者CXCL8、CXCR1免疫著色較深，而CXCR2免疫著色較淺;PMNs內(nèi)HBVDNA(+)者CXCL8、CXCR1免疫著色亦較深，而CX C

7、R2免疫著色亦較淺。與對(duì)照組相比，CXCL8、CXCR1的表達(dá)水平差異均有顯著性(P＜0.05)，而CXCR2的表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　結(jié)論:HBV除對(duì)肝細(xì)胞具有較高親嗜性，還能侵染中性粒細(xì)胞，形成肝外潛伏或隱匿感染，此可能是導(dǎo)致慢性乙肝病情遷延反復(fù)、久治難愈的重要病因。慢性乙肝患者外周血CXCL8含量增高，PMNs內(nèi)CXCL8、CXCR1、CXCR2的mRNA水平增高，其中，血清CXCL8水平及CXCL8、CXC

8、R1的mRNA與血清ALT含量呈正相關(guān)。HBV侵染中性粒細(xì)胞后可干擾宿主細(xì)胞正常代謝，使CXCL8分泌增加，細(xì)胞膜上CXCR1、CXCR2表達(dá)增強(qiáng)。CXCL8主要位于PMNs胞漿中，CXCR1、CXCR2多見(jiàn)于胞漿和胞膜上，其著色程度與患者HBeAg表達(dá)、HBV DNA載量密切相關(guān)。HBV侵染中性粒細(xì)胞后可使胞內(nèi)分泌釋放CXCL8進(jìn)一步增加，胞膜CXCR1表達(dá)進(jìn)一步增強(qiáng)。高表達(dá)CXCR1的中性粒細(xì)胞又與CXCL8相互作用，趨化吸引更多中