冷凍-藥物聯(lián)合損傷PC-3細胞活性的研究.pdf

1、冷凍治療技術是一種比較安全的治療手段，可減少術中出血，減輕疼痛，可增強機體免疫力，抑制及破壞腫瘤細胞生長，促使轉移病灶的吸收。由于冷凍外科具有上述的優(yōu)點，在醫(yī)學界得到廣泛的重視，臨床上已得到廣泛的應用。冷凍手術現(xiàn)在已廣泛用于皮膚、腫瘤、婦科、泌尿科以及肝臟等各種疾病的治療。用冷凍治療前列腺癌腫瘤時，因為前列腺底部與直腸臨近，冷量過大會傷及直腸，引起并發(fā)癥，所以無法達到安全的冷凍邊界，使得冷凍邊界部分細胞存活，引發(fā)疾病的復發(fā)。因此，單純冷

2、凍療效還是有限的，以冷凍為基礎的各種療法的聯(lián)合應用是冷凍治療發(fā)展的必然趨勢。冷凍與化療藥物聯(lián)合應用具有協(xié)同殺死腫瘤的作用，但兩者聯(lián)合過程中，加藥的時間以及藥物的劑量控制都有待進一步的研究。本文對冷凍-5-FU聯(lián)合應用過程中不同加藥時間對前列腺癌(PC-3)細胞活率的影響以及冷凍后在不同時間點細胞凋亡情況進行了研究。 首先，進行了置核實驗的研究，并對人的PC-3細胞在慢速冷凍過程中的變化進行了觀察。通過兩種不同置核方式的比較得出，

3、冷臺需要在-4℃置核，才能出現(xiàn)冰晶，而用預冷針頭只需在-1.5℃置核，就能出現(xiàn)冰晶。但用冷臺置核時，不用將冷臺蓋旋下，可以避免空氣對溶液的影響。所以本實驗中，都是利用冷臺系統(tǒng)本身的特點進行置核。細胞懸液置核后，降溫速率為5℃/min時，細胞外冰晶呈枝狀生長，PC-3細胞體積變小，復溫后細胞體積稍微增大。 其次，研究了慢速冷凍過程中降溫速率、復溫速率及冷凍終溫對PC-3細胞活率的影響，并對冷凍后細胞的死亡方式進行了分析。實驗結果表

4、明，在相同終溫條件下，降溫速率越快、復溫速率越慢，細胞的活率愈低。不同終溫時，溫度越低，細胞的活率越低。冷凍后PC-3細胞用Hoechst33342和PI雙染的方法分析表明，細胞死亡的方式有三種：細胞凋亡、細胞壞死和細胞破裂，但主要方式為細胞壞死和細胞破裂。 最后，研究了冷凍-5-FU聯(lián)合應用過程中不同加藥時間對前列腺癌(PC-3)細胞活率的影響以及不同加藥時間對細胞死亡方式的影響。實驗考察了冷凍前加藥、冷凍同時加藥以及冷凍后加