EGCG降低人肺癌A549-DDP細胞的多藥耐藥性和機制的初步研究.pdf

1、，一l8l53南華大學學位論文原創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得南華大學或其他單位的學位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻均已在論文中作了明確的說明。本人完全意識到本聲明的法律結果由本人承擔。作者簽名：眷專趕沙7年j峒舢南華大學學位論文版權使用授權書本學位

2、論文是本人在南華大學攻讀——(博／碩)士學位期間在導師指導下完成的學位論文。本論文的研究成果歸南華大學所有，本論文的研究內容不得以其它單位的名義發(fā)表。本人同意南華大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即：學校有權保留學位論文，允許學位論文被查閱和借閱；學校可以公布學位論文的全部或部分內容，可以采用復印、縮印或其它手段保留學位論文；學?？筛鶕?jù)國家或湖南省有關部門規(guī)定送交學位論文。同意學校將論文加入《中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫》，并按《中

3、國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫出版章程》規(guī)定享受相關權益。同意授權中國科學信息技術研究所將本學位論文收錄到《中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫》，并通過網絡向社會公眾提供信息服務。對于涉密的學位論文，解密后適用該授權。作者簽名：嵴抄矽P導師簽名：1呦帥EG0(3降低人肺癌A549／DDP細胞的多藥耐藥性和機制的初步研究碩士研究生：蕭赦導師：羅招陽教授中文摘要目的：探討EGCG對肺癌耐藥細胞株A549／DDP耐藥性的逆轉作用及機制。方法：MTT法檢測

4、EGCG對A549／DDP細胞的非毒性劑量以及EGCG對A549／DDP細胞藥物敏感性的影響；ICPMS法檢測細胞內順鉑濃度的變化；AO／EB染色法檢測EGCG聯(lián)合順鉑處理A549／DDP細胞前后凋亡的形態(tài)學改變；流式細胞術檢測凋亡率；RTPCR方法觀察EGCG作用前后耐藥基因GSTn、MRP2mRNA表達的變化；WesternBlot方法觀察EGCG作用前后耐藥蛋白GSTn、MRP2、Survivin表達的變化。結果：MTT比色法顯示

5、EGCG在低于7231xg／ml時對A549／DDP細胞的抑制率低于10％；20rtg／ml、40Jtg／ml、601xg／mlEGCG均可增加細胞對順鉑的敏感性；ICPMS法檢測細胞內順鉑濃度隨著EGCG濃度的增大逐漸增高；熒光顯微鏡下觀察到EGCG處理后細胞體積縮小，核固縮，呈典型的凋亡形態(tài)學改變；流式細胞術顯示，20pg／ml、401xg／ml、601xg／mlEGCG聯(lián)合順鉑處理細胞24小時后，凋亡率逐漸增加，說明EGCG聯(lián)合順

6、鉑能夠促進肺癌耐藥細胞株A549／DDP凋亡；RTPCR方法觀察EGCG作用前后耐藥基因GST；t、MRP2mRNA表達均減弱；Westernblot方法檢測發(fā)現(xiàn)，不同濃度的EGCG處理細胞24小時后GSTx、MRP2、Survivin蛋白表達均下調。結論：EGCG能夠部分逆轉A549／DDP細胞對順鉑的耐藥性，其機制可能與降低GSTn、MRP2表達從而增加了細胞內的藥物濃度，下調Survivin蛋白的表達誘導凋亡有關。關鍵詞：EGCG