TGFBI抑制惡性間皮瘤和乳腺癌細(xì)胞增生與侵襲的體內(nèi)外研究.pdf

1、[目的]轉(zhuǎn)化生長因子誘導(dǎo)的基因(TGFBI)作為一個(gè)細(xì)胞外基質(zhì)分子，倍受關(guān)注的是其調(diào)節(jié)細(xì)胞粘附和遷移功能。但是近年來發(fā)現(xiàn)，TGFBI在正常細(xì)胞高表達(dá)，而在腫瘤細(xì)胞表達(dá)下調(diào)或缺失。因此，本研究觀察TGFBI是否抑制惡性間皮瘤和乳腺癌細(xì)胞的增生和侵襲，評(píng)價(jià)TGFBI作為一個(gè)腫瘤抑制基因的潛在價(jià)值。[方法]使用pRc/CMV2載體轉(zhuǎn)染TGFBI于惡性間皮瘤細(xì)胞NCI-H28和乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231中，分別得到穩(wěn)定性表達(dá)外源性TGFBI

2、的惡性間皮瘤細(xì)胞株(T2804、T2806和T2807)和乳腺癌細(xì)胞株(T23108、T23109和T23113)。使用一系列細(xì)胞增生和侵襲測試系統(tǒng)，檢測TGFBI對(duì)惡性間皮瘤和乳腺癌細(xì)胞增生和侵襲的影響，并分析其作用的可能機(jī)制，最后使用裸鼠進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證TGFBI對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用。[結(jié)果]細(xì)胞增生實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，TGFBI可以抑制惡性間皮瘤和乳腺癌細(xì)胞的增生，使間皮瘤細(xì)胞和乳腺癌細(xì)胞的倍增時(shí)間分別增加了4.38和1.16倍，對(duì)血

3、清生長因子刺激反應(yīng)的增生率降低了48.78％和38.52％，軟瓊脂克隆形成率減少了48.54％和90.89％。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)只有細(xì)胞分泌的TGFBI而不是重組的人TGFBI蛋白(rh-TGFBI)具有抑制腫瘤細(xì)胞增生的作用。細(xì)胞周期分析結(jié)果顯示，TGFBI增加腫瘤細(xì)胞G1期的比例，延緩細(xì)胞進(jìn)入S期，與它提高p21和p53的瞬時(shí)表達(dá)有關(guān)。研究還發(fā)現(xiàn)TGFBI可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞衰老。侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，TGFBI可以使惡性間皮瘤和乳腺癌細(xì)胞的侵襲

4、能力分別降低了45.01％和37.62％，MMP2/9明膠酶的活性降低了7.59和2.53倍。TGFBI可以增加腫瘤細(xì)胞粘附于rh-TGFBI與Fibronectin混合的細(xì)胞外基質(zhì)，可以抑制間皮瘤細(xì)胞的遷移，但是并不影響乳腺癌細(xì)胞的遷移，可以提高乳腺癌細(xì)胞Integrins a5的表達(dá)。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，TGFBI可以使裸鼠乳腺癌的腫瘤發(fā)生率減少了16.97％，潛伏期延長2周。Ki-67和MECA-32蛋白表達(dá)的結(jié)果提示，TGFBI明顯地