P110δ阻滯劑對哮喘小鼠NF-KB和IL-17表達的影響.pdf

1、目的：
　　通過觀察鼻腔內(nèi)滴入p110δ阻滯劑(IC87114)對哮喘小鼠肺組織中NF-KB和白介素17表達的影響,探討p110δ、NF-KB、IL-17三者在哮喘發(fā)病機制中的作用以及相互關(guān)系,從而為哮喘治療提供新的理論依據(jù)。
　　方法：
　　隨機將40只雌性BALB/C小鼠分為哮喘模型組(X)(N=8)、阿奇霉素干預組(A)(N=8)、空白對照組(K)(N=8)、IC87114干預組(大劑量Y1、小劑量Y2)(N=1

2、6)。哮喘模型組:每只小鼠在第1天、第8天、第15天腹腔注射0.2mL抗原混懸液(雞卵清蛋白OVA100ug+氫氧化鋁2mg+生理鹽水0.2m1)致敏,第16天開始激發(fā),經(jīng)0.75％戊巴比妥麻醉后,滴鼻后激發(fā),每只小鼠滴入40uL2％OVA溶液(2gOVA+100mL生理鹽水),連續(xù)7天。阿奇霉素干預組致敏同哮喘組,于三次激發(fā)前30分鐘腹腔注射阿奇霉素針劑(50mg/Kg)。IC87114大小劑量組致敏同哮喘組,于第16天、第18天、第

3、21天滴鼻給予抑制劑,時間分別為激發(fā)前1小時、激發(fā)前1小時、激發(fā)后3小時,大小劑量組濃度分別為1mg/Kg.d、0.1mg/Kg.d?？瞻捉M第1天、第8天、第15天腹腔注射0.2mL生理鹽水,第16天開始戊巴比妥麻醉后,40uL生理鹽水滴鼻7天。所有小鼠,都于末次激發(fā)后48小時后處死。采用HE染色來評估小鼠肺組織的一般形態(tài)和氣道炎性細胞浸潤情況;酶聯(lián)免疫夾心法(ELISA)測血清中IL-17、pIp3含量;用免疫組織化學來檢測肺組織中N

4、F-KBp65表達;用RT-pCR檢測小鼠肺組織中IL-17mRNA量。各組數(shù)據(jù)均用( X±)表示,不同組間行單因素方差分析(ONe-wAy ANOVA), S方差齊者兩兩比較采用S-N-K檢驗,若方差不齊則采用TAmhANeI法。血清中IL-17、IC87114相關(guān)性,用直線相關(guān)分析,采用BIvArIATe過程的peArsoN等級相關(guān)法。用SpSSL3軟件統(tǒng)計處理數(shù)據(jù)。
　　結(jié)果：
　　(1)肺組織病理學HE染色:X組可見

5、小氣道及小血管周圍大量的炎性細胞侵潤,粘膜及粘膜下層水腫,肺泡腔內(nèi)可見嗜酸性粒細胞、單核細胞及溢出的紅細胞。Y1、Y2、A組炎細胞、滲出物較少,支氣管上皮基本上完整,可見明顯的炎癥吸收。Y1組最明顯,Y2組炎癥吸收比較差。K組小氣道的粘膜無明顯水腫,管腔光滑、無閉塞,周圍小血管未見炎性細胞的侵潤。(2)肺組織免疫組織化學中NF-KBp65表達:X組肺組織氣道上皮細胞中NF-KBp65呈強陽性,K組表達呈陰性,Y1、Y2、A組呈陽性,其中

6、Y2較強,Y1較弱。(3)血清中IL-17、pIp3的含量。1)IL-17含量:各組含量由高到低分別為,X組、Y2組、A組、Y1組、K組。五組之間的差異具有統(tǒng)計學意義(p