乳腺癌中MAGE-A9、MAGE-A11、MAGE-C1和MAGE-C2基因的表達(dá)及其表達(dá)機制的研究.pdf

1、乳腺癌是當(dāng)代影響女性健康最嚴(yán)重的疾病之一，近年來在我國的發(fā)病率呈上升趨勢。乳腺癌目前的治療仍以手術(shù)治療為主，放、化療和內(nèi)分泌治療為輔。然而這些治療方法對于腫瘤的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移以及晚期腫瘤，卻難以獲得理想療效，因此建立特異性的腫瘤免疫療法，使其成為重要的輔助治療甚至主要治療手段，是目前研究的熱點。
　　癌/睪丸抗原(CTA)是腫瘤相關(guān)抗原的一種，其在除睪丸和胎盤以外的正常人體組織中均不表達(dá)，但在多種不同組織類型的腫瘤中有較高的表達(dá)，因此

2、，CTA可作為腫瘤特異性免疫治療的理想靶點。MAGE是CTA的一個亞家族成員，和CTA有著相同的表達(dá)模式，其編碼的抗原在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)加工產(chǎn)生抗原肽，與HLA-Ⅰ類分子結(jié)合成復(fù)合物，可被自體細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)特異性識別，誘導(dǎo)出對相應(yīng)腫瘤細(xì)胞的特異性殺傷，從而達(dá)到治療腫瘤的目的。
　　導(dǎo)師所領(lǐng)導(dǎo)課題組近年來一直致力于對MAGE家族的研究。本研究首次采用RT-PCR和免疫組織化學(xué)方法對60例乳腺正常組織、60例乳腺良性病變（纖維瘤

3、及腺?。┮约?0例原發(fā)性乳腺癌組織中MAGE-A9、MAGE-A11、MAGE-C1和MAGE-C2的mRNA及蛋白表達(dá)情況進行了研究，并分析其表達(dá)與乳腺癌臨床病理學(xué)指標(biāo)以及預(yù)后之間的關(guān)系;應(yīng)用不同濃度的DNA甲基化抑制劑和組蛋白去乙酰化酶抑制劑處理兩種乳腺癌細(xì)胞株，觀察藥物處理前后MAGE-A9、MAGE-A11、MAGE-C1、MAGE-C2基因表達(dá)水平的變化，初步探索MAGE-A9、MAGE-A11、MAGE-C1、MAGE-C2

4、表達(dá)的分子生物學(xué)機制。
　　主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　第一部分腫瘤抗原MAGE-A9和MAGE-A11在乳腺癌組織中的表達(dá)及與乳腺癌臨床病理學(xué)指標(biāo)和預(yù)后的關(guān)系
　　目的:檢測MAGE-A9和MAGE-A11在乳腺正常組織、乳腺良性病變以及乳腺癌組織中的表達(dá)，并分析其表達(dá)與乳腺癌臨床病理學(xué)指標(biāo)以及預(yù)后之間的關(guān)系。
　　方法:采用RT-PCR和免疫組織化學(xué)的實驗方法分別檢測了MAGE-A9和MAGE-A11 mR

5、NA及蛋白在60例乳腺正常組織、60例乳腺良性病變和60例乳腺癌組織中的表達(dá)情況，并分析兩者的表達(dá)與乳腺癌臨床病理學(xué)指標(biāo)（包括患者年齡、腫瘤大小、病理類型、組織學(xué)分級、臨床分期、腋淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、有無脈管瘤栓、ER、PR和HER-2）之間的關(guān)系。通過病例隨訪，分析MAGE-A9和MAGE-A11蛋白表達(dá)與乳腺癌患者預(yù)后之間的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　1、MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA在乳腺正常組織、乳腺良性病變和乳腺癌

6、組織中的表達(dá)及與乳腺癌臨床病理學(xué)指標(biāo)之間的關(guān)系
　　60例乳腺正常組織及60例乳腺良性病變中未見MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA的表達(dá)，而60例乳腺癌組織標(biāo)本中MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA陽性表達(dá)率分別為45％和66.7％。
　　MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA的表達(dá)與ER及HER-2的表達(dá)呈正相關(guān)。ER表達(dá)陽性的乳腺癌患者，其MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA的陽性表達(dá)率分別高于E

7、R表達(dá)陰性的乳腺癌患者(A9:x2=4.865，P=0.027;A11:x2=5.742，P=0.017)。HER-2表達(dá)陽性的乳腺癌患者，其MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA的表達(dá)陽性率分別高于HER-2表達(dá)陰性的乳腺癌患者（A9:x2=6.16,P=0.013;x2=4.266,P=0.039）。
　　MAGE-A9 mRNA的表達(dá)與乳腺癌患者的年齡(x2=2.372，P=0.366)、腫瘤大小（x2=3.125，P=

8、0.246）、病理類型（x2=5.104，P=0.08）、臨床分期(x2=3.326，P=0.190)、組織學(xué)分級(x2=1.304，P=0.562）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（x2=0.180，P=0.672）、瘤栓(x2=2.095，P=0.148)及PR表達(dá)(x2=1.358，P=0.244)均無相關(guān)性。
　　MAGE-A11 mRNA的表達(dá)與乳腺癌患者的年齡(x2=0.399，P=0.895）、腫瘤大?。▁2=2.687，P=0.263

9、）、病理類型（x2=5.312，P=0.064）、臨床分期（x2=2.461，P=0.305）、組織學(xué)分級（x2=0.525，P=0.893）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(x2=1.250，P=0.264)、瘤栓(x2=0.549，P=0.459)及PR表達(dá)(x2=0.601，P=0.438)均無相關(guān)性。
　　2、MAGE-A9和MAGE-A11蛋白在正常睪丸組織中的表達(dá)
　　在正常睪丸組織中，MAGE-A9和MAGE-A11主要表達(dá)于初級

10、精母細(xì)胞和精原細(xì)胞中，且主要定位于細(xì)胞質(zhì)，部分定位于細(xì)胞核。
　　3、MAGE-A9和MAGE-A11蛋白在乳腺正常組織、乳腺良性病變、乳腺癌組織中的表達(dá)及與乳腺癌臨床病理學(xué)指標(biāo)之間的關(guān)系
　　MAGE-A9和MAGE-A11蛋白主要表達(dá)于乳腺癌細(xì)胞的胞質(zhì)中，部分表達(dá)于細(xì)胞核，乳腺癌組織中MAGE-A9和MAGE-A11蛋白陽性表達(dá)率分別為43.3％和63.3％，而60例乳腺正常組織及60例乳腺良性病變中均未見MAGE-A9

11、和MAGE-A11蛋白表達(dá)。
　　MAGE-A9(r=0.967,κ=0.966, P=0.000)和MAGE-A11(r=0.929,κ=0.927，P=0.000)mRNA與蛋白表達(dá)具有一致性，呈正相關(guān)。
　　MAGE-A9和MAGE-A11蛋白的表達(dá)與ER及HER-2的表達(dá)呈正相關(guān)，ER表達(dá)陽性的乳腺癌患者，其MAGE-A9和MAGE-A11蛋白的陽性表達(dá)率分別高于ER表達(dá)陰性的乳腺癌患者(A9:x2=4.344，P=

12、0.037; A11:x2=4.311，P=0.038)。HER-2表達(dá)陽性的乳腺癌患者，其MAGE-A9和MAGE-A11蛋白的陽性表達(dá)率分別高于HER-2表達(dá)陰性的乳腺癌患者(A9:x2=4.671, P=0.031; A11: x2=5.967,P=0.015)。
　　MAGE-A9蛋白的表達(dá)與乳腺癌患者的年齡（x2=3.621，P=0.209）、腫瘤大小(x2=4.188，P=0.116）、病理類型(x2=4.186，P=

13、0.122)、臨床分期（x2=2.658，P=0.273）、組織學(xué)分級（x2=1.006，P=0.618）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（x2=0.045，P=0.832）、瘤栓（x2=2.807，P=0.094）及PR表達(dá)(x2=1.067，P=0.302)均無相關(guān)性。
　　MAGE-A11蛋白的表達(dá)與乳腺癌患者的年齡（x2=0.548，P=0.808）、腫瘤大小(x2=2.943，P=0.231)、病理類型(x2=3.257，P=0.203)、

14、臨床分期（x2=4.232，P=0.117）、組織學(xué)分級（x2=0.964，P=0.732）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（x2=3.062，P=0.08）、瘤栓（x2=1.386，P=0.239）及PR表達(dá)(x2=1.270，P=0.260)均無相關(guān)性。
　　4 MAGE-A9和MAGE-A11蛋白表達(dá)與乳腺癌患者生存率的關(guān)系
　　MAGE-A9和MAGE-A11蛋白表達(dá)陽性的乳腺癌患者的生存率分別低于MAGE-A9和MAGE-A11蛋白表

15、達(dá)陰性的乳腺癌患者(A9:x2=5.348，P=0.021; A11:x2=4.192, P=0.041)。
　　結(jié)論:
　　1、乳腺正常組織和乳腺良性病變中均未發(fā)現(xiàn)MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA及蛋白的表達(dá)。乳腺癌組織中MAGE-A9和MAGE-A11mRNA表達(dá)陽性率分別為45％和66.7％，蛋白陽性表達(dá)率分別為43.3％和63.3％，提示MAGE-A9和MAGE-A11是腫瘤特異性抗原，可作為乳腺癌免疫治療

16、的靶點。
　　2、MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA和蛋白表達(dá)與乳腺癌患者的年齡、病理類型、組織學(xué)分級、臨床分期、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、瘤栓、PR表達(dá)均無相關(guān)性，但與ER和HER-2的表達(dá)呈正相關(guān)。ER和HER-2表達(dá)陽性的乳腺癌患者，其MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA和蛋白的表達(dá)率明顯高于ER和HER-2表達(dá)陰性的乳腺癌患者，提示MAGE-A9和MAGE-A11有望成為指導(dǎo)乳腺癌治療及監(jiān)測預(yù)后的重要指標(biāo)。

17、>　　3、MAGE-A9和MAGE-A11蛋白表達(dá)陽性的乳腺癌患者的生存率分別低于MAGE-A9和MAGE-A11蛋白表達(dá)陰性的乳腺癌患者，說明MAGE-A9和MAGE-A11高表達(dá)可能是乳腺癌患者不良預(yù)后的一個重要標(biāo)志。
　　第二部分腫瘤抗原MAGE-C1和MAGE-C2在乳腺癌組織中的表達(dá)及與乳腺癌臨床病理學(xué)指標(biāo)和預(yù)后的關(guān)系
　　目的:檢測MAGE-C1和MAGE-C2在乳腺正常組織、乳腺良性病變以及乳腺癌組織中的表達(dá)，

18、并分析其表達(dá)與乳腺癌臨床病理學(xué)指標(biāo)以及預(yù)后之間的關(guān)系。
　　方法:采用RT-PCR和免疫組織化學(xué)的實驗方法分別檢測了MAGE-C1和MAGE-C2 mRNA及蛋白在60例乳腺正常組織、60例乳腺良性病變和60例乳腺癌組織中的表達(dá)情況，并分析兩者的表達(dá)與乳腺癌臨床病理學(xué)指標(biāo)之間的關(guān)系。通過病例隨訪，分析MAGE-C1和MAGE-C2蛋白表達(dá)與乳腺癌患者預(yù)后之間的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　1、MAGE-C1和MAGE-C2

19、mRNA在乳腺正常組織、乳腺良性病變和乳腺癌組織中的表達(dá)及其與乳腺癌臨床病理學(xué)指標(biāo)之間的關(guān)系
　　60例乳腺正常組織及60例乳腺良性病變中均未見MAGE-C1和MAGE-C2 mRNA的表達(dá)，而60例乳腺癌組織標(biāo)本中MAGE-C1和MAGE-C2 mRNA陽性表達(dá)率分別為43.3％和61.7％。
　　MAGE-C1和MAGE-C2 mRNA的表達(dá)與乳腺癌的組織學(xué)分級呈正相關(guān)，組織學(xué)分級為Ⅲ級的乳腺癌患者，其MAGE-C1和M

20、AGE-C2 mRNA陽性表達(dá)率分別高于組織學(xué)分級Ⅰ級的乳腺癌患者（C1: x2=8.832，P=0.01;C2:x2=8.575，P=0.01）。
　　MAGE-C2 mRNA表達(dá)還與乳腺癌的病理類型及瘤栓表達(dá)呈正相關(guān)。瘤栓表達(dá)陽性的乳腺癌患者，其MAGE-C2 mRNA的陽性表達(dá)率高于瘤栓表達(dá)陰性的乳腺癌患者(x2=6.094，P=0.014)。病理類型為浸潤性導(dǎo)管癌的患者，其MAGE-C2 mRNA的陽性表達(dá)率分別高于浸潤性

21、小葉癌和髓樣癌的患者(x2=11.707，P=0.002)。
　　MAGE-C1 mRNA的表達(dá)與乳腺癌患者的年齡(x2=0.403，P=0.907)、腫瘤大?。▁2=0.976，P=0.671）、病理類型(x2=2.256，P=0.352)、臨床分期（x2=0.684，P=0.765）、淋巴轉(zhuǎn)移（x2=0.102，P=0.75）、瘤栓(x2=0.008，P=0.93)、ER(x2=0.611,P=0.434)、PR(x2=0.1

22、6,P=0.689)及HER-2表達(dá)(x2=0.307，P=0.58)均無相關(guān)性。
　　MAGE-C2 mRNA的表達(dá)與乳腺癌患者的年齡(x2=0.228，P=1.0)、腫瘤大小(x2=0.579，P=0.815)、臨床分期（x2=4.059，P=0.115）、淋巴轉(zhuǎn)移（x2=2.303,P=0.129）、ER(x2=0.004,P=0.947)、PR(x2=0.000,P=1.0)及HER-2表達(dá)(x2=2.366，P=0.12

23、4)均無相關(guān)性。
　　2、MAGE-C1和MAGE-C2蛋白在正常睪丸組織中的表達(dá)
　　在正常睪丸組織中，MAGE-C1和MAGE-C2主要表達(dá)于初級精母細(xì)胞和精原細(xì)胞中，且主要定位于細(xì)胞質(zhì)，部分定位于細(xì)胞核。
　　3、MAGE-C1和MAGE-C2蛋白在乳腺正常組織、乳腺良性病變、乳腺癌組織中的表達(dá)及與乳腺癌臨床病理學(xué)指標(biāo)之間的關(guān)系
　　MAGE-C1和MAGE-C2蛋白主要表達(dá)于乳腺癌細(xì)胞的胞質(zhì)中，部分表達(dá)于

24、細(xì)胞核，60例乳腺癌組織中MAGE-C1和MAGE-C2蛋白陽性表達(dá)率分別為38.3％和58.3％，而60例乳腺正常組織及60例乳腺良性病變中均未見MAGE-C1和MAGE-C2蛋白表達(dá)。
　　MAGE-C1(r=0.902,κ=0.897,P=0.000)和MAGE-C2(r=0.933,κ=0.931，P=0.000)mRNA與蛋白表達(dá)具有一致性，呈正相關(guān)。
　　MAGE-C1和MAGE-C2蛋白表達(dá)與乳腺癌的組織學(xué)分級

25、呈正相關(guān)，組織學(xué)分級為Ⅲ級的乳腺癌患者，其MAGE-C1和MAGE-C2蛋白的陽性表達(dá)率分別高于組織學(xué)分級Ⅰ級的乳腺癌患者（C1: x2=6.233，P=0.038;C2:x2=7.471,P=0.017）。
　　MAGE-C2蛋白表達(dá)還與乳腺癌的病理類型、瘤栓表達(dá)呈正相關(guān)。瘤栓表達(dá)陽性的乳腺癌患者，其MAGE-C2蛋白的陽性表達(dá)率高于瘤栓表達(dá)陰性的乳腺癌患者（x2=5.503，P=0.019）。病理類型為浸潤性導(dǎo)管癌的患者，其M

26、AGE-C2蛋白的陽性表達(dá)率分別高于浸潤性小葉癌和髓樣癌的患者（x2=10.889,P=0.004）。
　　MAGE-C1蛋白的表達(dá)與乳腺癌患者的年齡（x2=1.115，P=0.729）、腫瘤大小(x2=1.659，P=0.435)、病理類型(x2=3.173，P=0.206)、臨床分期（x2=0.383，P=0.87）、淋巴轉(zhuǎn)移（x2=0.012，P=0.914）、瘤栓(x2=0.099，P=0.753)、ER(x2=0.533

27、,P=0.465)、PR(x2=0.097,P=0.755)及HER-2表達(dá)（x2=1.422，P=0.233）均無相關(guān)性。
　　MAGE-C2蛋白的表達(dá)與乳腺癌患者的年齡（x2=0.525，P=0.903）、腫瘤大小(x2=0.359，P=0.936)、臨床分期(x2=4.022，P=0.15)、淋巴轉(zhuǎn)移（x2=1.143,P=0.285）、ER(x2=0.429,P=0.513)、PR(x2=0.07,P=0.791)及HER

28、-2表達(dá)(x2=1.936，P=0.164)均無相關(guān)性。
　　4、MAGE-C1和MAGE-C2蛋白表達(dá)與乳腺癌患者生存率的關(guān)系
　　MAGE-C1和MAGE-C2蛋白表達(dá)陽性的乳腺癌患者，其生存率分別低于MAGE-C1和MAGE-C2蛋白表達(dá)陰性的乳腺癌患者(C1: x2=4.213，P=0.04; C2:x2=4.467, P=0.035)。
　　結(jié)論:
　　1、乳腺正常組織和乳腺良性病變中均未發(fā)現(xiàn)MAGE-

29、C1和MAGE-C2mRNA及蛋白的表達(dá)。乳腺癌組織中MAGE-C1和MAGE-C2 mRNA陽性表達(dá)率分別為43.3％和61.7％，MAGE-C1和MAGE-C2蛋白陽性表達(dá)率分別為38.3％和58.3％，提示MAGE-C1和MAGE-C2可作為腫瘤標(biāo)志物檢測乳腺癌的發(fā)生，也可成為乳腺癌免疫治療的理想靶點。
　　2、MAGE-C1 mRNA和蛋白表達(dá)與乳腺癌患者的年齡、病理類型、臨床分期、腫瘤大小、淋巴轉(zhuǎn)移、瘤栓、ER、PR、H

30、ER-2表達(dá)均無相關(guān)性，MAGE-C2 mRNA和蛋白表達(dá)與乳腺癌患者的年齡、臨床分期、腫瘤大小、淋巴轉(zhuǎn)移、ER、PR、HER-2表達(dá)均無相關(guān)性。MAGE-C1和MAGE-C2mRNA和蛋白表達(dá)與乳腺癌的組織學(xué)分級呈正相關(guān)。MAGE-C2 mRNA和蛋白表達(dá)還與乳腺癌的病理類型、瘤栓表達(dá)呈正相關(guān)，提示MAGE-C1和MAGE-C2的表達(dá)和乳腺癌的惡性程度密切相關(guān)，且不同病理類型的腫瘤表達(dá)MAGE-C2的頻率不同，以癌睪丸抗原為基礎(chǔ)進行的

31、腫瘤免疫治療可能更適合在某些病理類型的腫瘤中進行。
　　3、MAGE-C1和MAGE-C2蛋白的高表達(dá)與乳腺癌患者的低生存率正相關(guān)，說明MAGE-C1和MAGE-C2高表達(dá)可能是乳腺癌患者不良預(yù)后的一個重要標(biāo)志。
　　第三部分乳腺癌中腫瘤抗原 MAGE-A9、MAGE-A11、MAGE-C1和MAGE-C2表達(dá)機制的研究
　　目的:應(yīng)用DNA甲基化抑制劑5-aza-CdR和組蛋白去乙?；敢种苿㏕SA單獨或聯(lián)合處理MC

32、F-7、MDA-MB-231兩種乳腺癌細(xì)胞，分析藥物處理前后MAGE-A9、MAGE-A11、MAGE-C1、MAGE-C2基因表達(dá)的變化，初步探索它們表達(dá)的分子生物學(xué)機制。
　　方法:將實驗細(xì)胞分為4組:(1)對照組:同期培養(yǎng)的不加任何藥物處理的細(xì)胞;(2)5-aza-CdR組:分別用含2.5μ mol/L、5μ mol/L5-aza-CdR的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞72h;(3) TSA組:分別用含0.3μ mol/L、0.5μ mol

33、/L TSA的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞24h;(4)5-aza-CdR及TSA組:用含5μ mol/L5-aza-CdR的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞48h后再加入含0.5μ mol/LTSA的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24 h。藥物刺激72小時后，收集細(xì)胞，提取RNA，每組實驗重復(fù)三次。
　　結(jié)果:
　　1、藥物處理前后MCF-7、MDA-MB-231細(xì)胞中MAGE-A9和MAGE-A11mRNA表達(dá)水平的變化
　　RT-PCR結(jié)果顯示，未經(jīng)藥物處理的

34、MCF-7、MDA-MB-231細(xì)胞未見MAGE-A9和MAGE-A11 mRNA表達(dá)。應(yīng)用2.5μ mol/L、5μ mol/L5-aza-CdR分別作用72小時后可見MAGE-A9和MAGE-A11基因重新表達(dá)，且隨著藥物濃度增高，MAGE-A9和MAGE-A11基因表達(dá)逐漸增強。與單獨應(yīng)用5-aza-CdR相比較，聯(lián)合應(yīng)用5μ mol/L5-aza-CdR和0.5μmol/L TSA可使MAGE-A9和MAGE-A11基因表達(dá)進一

35、步增加。而0.3μmol/L、0.5μ mol/L TSA單獨作用均不能誘導(dǎo)出MAGE-A9和MAGE-A11基因的重新表達(dá)。
　　2、藥物處理前后MCF-7、MDA-MB-231細(xì)胞中MAGE-C1和MAGE-C2mRNA表達(dá)水平的變化
　　RT-PCR結(jié)果顯示，未經(jīng)藥物處理的MCF-7、MDA-MB-231細(xì)胞未見MAGE-C1 mRNA表達(dá)。單獨應(yīng)用2.5μ mol/L、5μ mol/L5-aza-CdR及0.3μ m

36、ol/L、0.5μ mol/L TSA均不能誘導(dǎo)出MAGE-C1基因的表達(dá)。而聯(lián)合應(yīng)用5μ mol/L5-aza-CdR和0.5μ mol/L TSA也未能誘導(dǎo)出MAGE-C1基因的表達(dá)。
　　RT-PCR結(jié)果顯示，未經(jīng)藥物處理的MCF-7、MDA-MB-231細(xì)胞未見MAGE-C2 mRNA表達(dá)。應(yīng)用2.5μ mol/L、5μ mol/L5-aza-CdR分別作用72小時后可見MAGE-C2基因重新表達(dá)，且隨著藥物濃度增高，基因

37、表達(dá)逐漸增強。與單獨應(yīng)用5-aza-CdR相比較，聯(lián)合應(yīng)用5μ mol/L5-aza-CdR和0.5μ mol/L TSA可使MAGE-C2基因表達(dá)進一步增加。而0.3μ mol/L、0.5μ mol/L TSA單獨作用均不能誘導(dǎo)出MAGE-C2基因的重新表達(dá)。
　　結(jié)論:
　　1、單獨應(yīng)用5-aza-CdR處理MCF-7及MDA-MB-231細(xì)胞可誘導(dǎo)MAGE-A9、MAGE-A11、MAGE-C2基因的表達(dá)，提示DNA去

38、甲基化是MAGE-A9、MAGE-A11和MAGE-C2基因表達(dá)重要機制。
　　2、聯(lián)合應(yīng)用5-aza-CdR和TSA可使MCF-7及MDA-MB-231細(xì)胞中MAGE-A9、MAGE-A11和MAGE-C2基因的表達(dá)進一步增加，而TSA單獨作用對基因表達(dá)沒有影響，說明DNA去甲基化和組蛋白乙酰化在MAGE基因的表達(dá)中具有協(xié)同作用，DNA去甲基化扮演了主導(dǎo)作用。
　　3、單獨或聯(lián)合應(yīng)用不同濃度的5-aza-CdR和TSA均不